首页 期刊 中国妇幼保健 EGFR基因靶向RNA干扰抑制卵巢癌细胞增殖的研究 【正文】

EGFR基因靶向RNA干扰抑制卵巢癌细胞增殖的研究

作者:杜鹃; 陈爱平; 宋旭霞 山东省青岛市第八人民医院妇产科; 266003; 青岛大学医学院附属医院妇科; 青岛大学医学院微生物学教研室
egfr基因   skov3   rna干扰  

摘要:目的:利用RNA干扰技术抑制卵巢癌细胞株skov3细胞表皮生长因子受体(EGFR)的表达及细胞的体外增殖活性。方法:根据EGFR mRNA序列设计特异性siRNA插入序列,体外合成该序列后将其定向克隆入线性化质粒pSilencer^TM2.1-U6 neo,以HifectinⅡ真核转染试剂将重组质粒转染至skov3细胞中,用RT-PCR和免疫细胞化学方法分别鉴定转染前后EGFR基因在mRNA和蛋白水平表达的变化;四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定转染前后细胞增殖活性的改变。结果:DNA测序证实EGFR siRNA表达载体的siRNA插入序列完全正确,该表达载体可特异性抑制EGFR基因的表达;转染后细胞的增殖受到抑制,其中第5天的抑制率达到30%(P〈0.05)。结论:靶向EGFR的序列特异性siRNA真核表达载体可有效抑制skov3细胞中EGFR基因的表达和细胞的增殖。

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