摘要:目的:研究SonicHedgehog(Shh)在雷奈酸锶(strontiumranelate,Sr)促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化中的作用。方法:采用全骨髓贴壁培养法分离、纯化、培养大鼠BMSCs,取第3-5代BM.SCs加入成骨诱导液诱导成骨分化,再加入不同浓度sr及Shh拮抗剂cyclopamine(Cy),分别观察它们对BMSCs向成骨细胞分化的影响。酶标法检测成骨细胞分化早期标志物碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)的活性;茜素红染色检测细胞钙化水平;Westernblotting法检测Shh和Runx2蛋白的表达情况。结果:Sr(3mmol/L)可以使细胞ALP活性增高,钙结节形成增加。Sr(0.1-5mmol/L)作用BMSCs7d,可明显促进Shh和Runx2蛋白的表达,且Shh蛋白在1mmol/LSr作用时表达最多,而Runx2在3mmol/LSr作用时表达最多。1mmol/LSr作用BMSCs不同时间(1、3、5、7d),呈时间依赖性地上调Shh和Runx2蛋白的表达。cy(10Iμmol/L)不仅拮抗sr对Shh和Runx2表达的上调作用,还抑制sr对ALP和钙结节形成的促进作用。结论:sr可通过上调Shh蛋白及成骨特异性转录因子Runx2的表达促进BMSCs向成骨细胞分化。
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