摘要：背景与目的：B细胞特异性的莫洛尼白血病毒插入位点1（B-cell-specific Moloney leukemia virus insertion site 1，BMI-1）期在放疗后DNA损伤中发挥重要作用。该研究采用siRNA干扰技术降低食管癌TE13细胞中BMI-1基因表达，探讨BMI-1的表达对X射线照射后食管癌细胞放射敏感性的影响。方法：针对BMI-1 mRNA序列，3对有效的干扰序列（siRNA1、siRNA2和siRNA3）和阴性对照序列由公司设计合成，瞬时转染食管癌TE13细胞，命名为BMI-1 siRNA1、BMI-1 siRNA2和BMI-1 siRNA3共3组，转染阴性对照序列组命名为NC组，未转染组命名为对照组。采用反转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）和蛋白［质］印迹法（Western blot）检测TE13各组中BMI-1在mRNA和蛋白水平的表达。采用MTT法检测BMI-1基因转染对TE13细胞增殖能力的影响。克隆形成实验检测BMI-1对TE13放射敏感性的作用。流式细胞术测定siRNA干扰BMI-1基因对细胞周期和凋亡分布的影响。RT-PCR和Western blot检测细胞内p16、CDK4基因和蛋白表达水平。结果：3对干扰序列使人BMI-1基因在mRNA和蛋白表达水平低于对照组和NC组，尤以siRNA3组效果最明显。选择siRNA3作为干扰组进行MTT和流式细胞术。MTT结果表明，BMI-1 siRNA3转染后BMI-1的低表达对细胞的增殖能力无明显影响；克隆形成实验的结果显示，空白对照组、NC组、干扰组的D0分别为2.514、2.506和1.761 Gy；Dq值分别为2.694、2.664和2.122 Gy；外推数N值分别为2.920、2.895和3.336；SF2值分别为0.826 8、0.823 1和0.625 5，可见对照组和空载组间放射敏感性差异无统计学意义（P〉0.05），而干扰组细胞的放射敏感性高于对照组和NC组；流式细胞术分析显示，6 Gy照射后，BMI-1 siRNA组G0/G1期比例明显高于对照组和空载组，G2/M期显著低于对照组和NC组，而未照射时BMI-1的低表达对细胞周期无明显影响。干扰BMI

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