摘要：用Sau3A I酶切甲基对硫磷降解菌DLL-1总DNA，与BamH I酶切的启动子探针载体pRobe-GFP酶连，转化E.coliDH5a，在选择性平板LB(Amp')七从大约1×10^4个菌落筛选到50个含启动子片断的阳性克隆．挑选其中一个阳性克隆，将启动子片断克隆到pIJ2925和pBBR-MCS2上构建成重组质粒pHGFP和广宿主标记载体pBBRGFP．然后将pHGFP载体上的启动子片断克隆到广宿主载体pTR102上，获得第二个广宿主标记载体pTRGFP．将pTRGFP和pBBRGFP通过三亲接合分别标记于DLL-1得到两株标记菌，即DLLTR和DLLBR．通过激光共聚焦显微镜观察和软件Lasersharp version 3．2分析发现pTRGFP在E．coli中表达很强而在DLL-1中表达很弱，而pBBRGFP正好相反．图5表2参12

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