摘要：目的应用小分子干扰RNA（siRNA）靶向沉默脂肪因子Apelin,观察对卵巢颗粒细胞信号蛋白Akt、叉头转录因子Foxo1a基因的表达及颗粒细胞凋亡的影响。方法选取因男方因素行（IVF）的不孕女性30例,于（OPU）日提取原代培养颗粒细胞,分别（1）加入Apelin10~8 mol/L于培养基内,分别于0min、5 min、10 min、15 min、30 min、60 min提取Akt、p Akt,利用定量PCR技术（RT-PCR）及蛋白印迹法（W-b）分别检测Akt、p Akt m RNA与蛋白的表达,探究Apelin因子对信号蛋白Akt的磷酸化作用;（2）转染沉默Apelin基因,利用信号阻断剂LY294002与HIMO分别阻断PI3K、Akt信号通路,48 h后利用MTT-OD法检测各组颗粒细胞增殖效果;（3）继续加入Apelin10~8 mol/L培养30 min后提取细胞蛋白,利用RT-RCR与W-b检测Akt、p Akt、Foxo1a m RNA水平与蛋白的表达。结果 （1）Apelin 5 min开始对信号蛋白Akt磷酸化,30 min作用达到高峰。（2）Apelin si RNA、PI3K信号阻断剂LY294002、Akt信号阻断剂HIMO对颗粒细胞进行转染干预处理48 h后,细胞蛋白p Akt的表达在干预组与对照组间有显著差异（P〈0.05）;（3）Foxo1a基因m RNA与蛋白的表达在细胞干预组与对照组间有显著差异,干预组显著高于对照组（P〈0.05）;细胞干预组之间Foxo1a m RNA与蛋白的表达无统计学差异。（4）MTT-OD检测处理后的颗粒细胞,对照组与实验组细胞增值率有显著差异（P〈0.05）,实验组OD值显著低于对照组,Apelin si RNA组与LY294002组、HIMO组之间OD值无统计学差异（P〉0.05）。结论 Apelin通过活化信号蛋白Akt上调下游基因Foxo1a m RNA与蛋白的表达,进而影响颗粒细胞增殖效应。

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