首页 期刊 医学争鸣 核基质MINT N端片段(365~1084aa)相互作用蛋白的筛选及鉴定 【正文】

核基质MINT N端片段(365~1084aa)相互作用蛋白的筛选及鉴定

作者:秦红; 孙强; 周鹏; 李军锋; 韩骅; 罗晓星 第四军医大学基础部; 医学遗传学与发育生物学教研室; 陕西; 西安; 710033; 第四军医大学基础部; 医学遗传学与发育生物学教研室; 陕西; 西安; 710033; 第四军医大学唐都医院干细胞医学中心; 陕西; 西安; 710038; 第四军医大学基础部; 药理学教研室; 陕西; 西安; 710033
核蛋白mint   msx2   notch信号途径   酵母双杂交  

摘要:目的:确定核蛋白MINT(Msx2-interacting nuclear target Protein)的功能及作用机制. 方法:利用酵母双杂交的方法,以MINT N端第365~1084位氨基酸(MINT-F2)为诱饵用酵母双杂交法筛选小鼠胚胎9日的cDNA文库. 用诱饵质粒和文库先后转化酵母宿主后,对1.0×108个酵母克隆进行营养筛选和β-半乳糖苷酶筛选,获得128个阳性克隆. 并提取质粒进行酶切鉴定,将获得的4个非重复克隆并进行序列分析. 结果:筛选出4个与MINT-F2相互作用的蛋白,它们分别是:67 ku层黏连蛋白受体,,2个16 S核糖体RNA,精氨酰-tRNA合成酶. 结论:成功筛选出与MINT-F2相互作用的蛋白,为进一步研究MINT的功能及作用机制打下基础.

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