摘要:目的:确定核蛋白MINT(Msx2-interacting nuclear target Protein)的功能及作用机制. 方法:利用酵母双杂交的方法,以MINT N端第365~1084位氨基酸(MINT-F2)为诱饵用酵母双杂交法筛选小鼠胚胎9日的cDNA文库. 用诱饵质粒和文库先后转化酵母宿主后,对1.0×108个酵母克隆进行营养筛选和β-半乳糖苷酶筛选,获得128个阳性克隆. 并提取质粒进行酶切鉴定,将获得的4个非重复克隆并进行序列分析. 结果:筛选出4个与MINT-F2相互作用的蛋白,它们分别是:67 ku层黏连蛋白受体,,2个16 S核糖体RNA,精氨酰-tRNA合成酶. 结论:成功筛选出与MINT-F2相互作用的蛋白,为进一步研究MINT的功能及作用机制打下基础.
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