首页 期刊 药学实践 鼠曲草简单重复序列间扩增反应体系的建立及优化 【正文】

鼠曲草简单重复序列间扩增反应体系的建立及优化

作者:江圣圭; 董志颖; 李卿; 赵英魁; 黄豆豆; 孙连娜 福建中医药大学药学院; 福建福州350122; 上海中医药大学中药学院; 上海201203; 海军军医大学附属长征医院药学部; 上海200003; 海军军医大学药学院; 上海200433
鼠曲草   简单重复序列间扩增   体系优化   引物筛选  

摘要:目的通过建立并优化鼠曲草简单重复序列间扩增(ISSR-PCR)反应体系,为鼠曲草后续遗传多样性研究提供实验依据。方法本研究首先采用单因素实验法和全面实验法优化鼠曲草ISSR-PCR反应体系,然后在最适体系下,分步进行引物及其退火温度的筛选,最后验证该体系的可行性。结果ISSR-PCR最适反应体系包括10μl Premix Taq DNA聚合酶、0.3μmol/L引物、10 ng DNA模板、灭菌水加至20μl;从100条通用引物中最终筛选出10条引物;验证结果表明该体系稳定性高、重复性好,且选定引物多态性好。结论本研究首次建立了鼠曲草ISSR-PCR扩增体系,并筛选出合适的引物,为鼠曲草后续遗传多样性研究夯实了基础。

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