首页 期刊 药物分析 BCR-ABL融合基因检测试剂盒质控品的建立 【正文】

BCR-ABL融合基因检测试剂盒质控品的建立

作者:曲守方; 于婷; 张娟丽; 胡小许; 郭李平; 赵金银; 高尚先; 黄杰 中国食品药品检定研究院; 北京100050; 河南省医疗器械检验所; 郑州450003; 中国科学院北京基因组研究所; 北京100101; 大连晶泰医学检验所; 大连116635
靶向药物   分子靶向治疗   慢性粒细胞白血病标志物   埃布尔森小鼠白血病病毒癌基因同源物1   融合基因  

摘要:目的:建立BCR-ABL融合基因质控品,评价人类BCR-ABL融合基因突变检测试剂盒的性能。方法:根据人类BCR-ABL e1a2和e14a2型融合基因m RNA序列,设计覆盖断裂点序列,合成目的融合基因序列。用限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ对含有目的融合基因的质粒和表达载体进行酶切,连接酶切产物。将连接产物转化DH5α感受态细胞,筛选单个阳性菌落进行验证。将正确的单个菌落进行超声诱导,制备假病毒溶液。用荧光逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对假病毒溶液提取的RNA进行检测。结果:PCR结果和测序结果表明成功构建人类BCR-ABL融合基因e1a2和e14a2型假病毒质粒;荧光RT-PCR结果表明构建的e1a2和e14a2型假病毒质粒能够表达目的 RNA,并且能被市售试剂盒正确检出,可以作为RNA质控品。结论:本研究建立人类BCR-ABL融合基因RNA质控品,用于评价BCR-ABL融合基因突变检测试剂盒的性能,为BCR-ABL融合基因相关白血病的临床诊断及靶向治疗提供指导。

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