摘要：目的探讨RNA干扰抑制组织型转谷氨酰胺酶（tissue transglutaminase,tTG）的表达对人转化生长因子β2（transforming growth factor-beta2,TGF-β2）诱导的晶状体上皮细胞（lens epithelial cells,LEC）转分化和细胞外基质沉积的抑制作用。方法设计并合成针对tTG的3对小干扰RNA（siRNA）：tTG-siRNA-1、tTG-siRNA-2、tTG-siRNA-3,用Real-time PCR和Western blot检测转染了siR-NA后HLE-B3细胞表达tTG mRNA和tTG蛋白的变化。然后将体外培养的HLE-B3细胞分为正常对照组、TGF-β2组和TGF-β2＋siRNA组。48h后,用Western blot检测各组tTG、平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、纤维连接蛋白（fibronec-tin,FN）和Ⅳ型胶原（collagenⅣ,Col-Ⅳ）的表达。结果转染tTG-siRNA-1、tTG-siRNA-2、tTG-siRNA-348h后,tTG mRNA的表达分别下降为空白对照组的46.60%、12.84%、66.75%（均为P〈0.05）;tTG蛋白的表达量分别下降为空白对照组的60.49%、27.87%、55.91%（均为P〈0.01）。Real-time PCR与Western blot检测结果一致显示了tTG-siRNA-2对tTG基因的抑制效果最佳。与正常对照组相比,TGF-β2组中tTG、α-SMA、FN、Col-Ⅳ的表达量均明显增加（均为P〈0.01）;与TGF-β2组相比,TGF-β2＋tTG-siRNA-2组中tTG、α-SMA、FN、Col-Ⅳ的表达量均明显减少（均为P〈0.01）。结论靶向tTG的siRNA可以显著降低tTG的表达水平,同时可以明显抑制TGF-β2诱导的HLE-B3细胞合成α-SMA、FN、Col-Ⅳ。提示tTG是介导TGF-β2诱导人LEC转分化和细胞外基质沉积的重要分子。

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