摘要:目的探讨端粒酶相关因素对培养的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞增生的影响.方法用常规培养法培养人RPE细胞后,分别用端粒酶抑制剂二甲基亚砜、热休克蛋白90抑制剂、无血清培养、端粒酶反义寡核苷酸、P16反义寡核苷酸处理,然后提取细胞mRNA,PCR扩增后电泳检测端粒酶mRNA表达.然后用MTT法检测无血清培养组、端粒酶反义寡核苷酸处理组、P16反义寡核苷酸处理组与常规培养组细胞增生状况.结果二甲基亚砜组、热休克蛋白90抑制剂组、无血清培养组、端粒酶反义寡核苷酸处理组,端粒酶mRNA表达受到抑制,凝胶分析系统软件分析结果电泳H值分别为80、116、90、81,而P16反义寡核苷酸处理组端粒酶mRNA表达增强,电泳H值为255.常规培养组H值为162,阴性对照组为0,阳性对照组(胃癌细胞)为255.MTT法显示:无血清培养组,端粒酶反义寡核苷酸处理组细胞活性下降,细胞生长抑制率上升.而P16反义寡核苷酸处理组细胞活性上升,细胞生长抑制率下降.结论端粒酶抑制剂二甲基亚砜、热休克蛋白90抑制剂、无血清培养、端粒酶反义寡核苷酸可抑制RPE细胞端粒酶mRNA表达,从而抑制RPE细胞增生;P16反义寡核苷酸可促进RPE细胞端粒酶mRNA表达,从而促进RPE细胞增生.
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