首页 期刊 遗传 二倍体马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ基因的克隆、序列分析及表达载体的构建 【正文】

二倍体马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ基因的克隆、序列分析及表达载体的构建

作者:卜庆云; 武亮; 杨世湖; 万建民 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室; 江苏省植物基因工程研究中心; 南京; 210095
伤害诱导  

摘要:根据GenBank发表的四倍体马铃薯栽培种(Solanum.tuberosum)来源的马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ基因序列,用PCR方法从二倍体马铃薯lVP101(Solanum.phurejia)cDNA文库和基因组DNA扩增得到马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ的cDNA和DNA,命名为PINⅡ-2x.测序表明,PINⅡ-2x基因组DNA全长580 bp,含有一个115bp的内含子,cDNA有462 bp(除去终止密码子).推测的PINⅡ-2x分子量是16 6 kD,等电点6 08.与其他马铃薯蛋白抑制剂Ⅱ同源性比较表明,核苷酸同源性高达88%;推测的氨基酸序列同源性为93%,并具有相同的活性中心.RT-PCR表明,PINⅡ-2x的mRNA在叶片中具有强烈的伤害诱导表达特性.同时,构建了分别以水稻Acf Ⅰ启动子和玉米Ubi启动子驱动PINⅡ-2x基因的双元载体.

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