摘要:目的 运用实时荧光定量 PCR 检测24株副溶血性弧菌热稳定直接溶血素(TDH)基因转录水平差异。方法 普通 PCR 法检测分离自患者、海产品和环境中的副溶血性弧菌 tdh 基因,tdh 阳性菌株提取细菌总 RNA 后逆转录合成 cDNA,检测无 DNA 污染后定量至同一浓度,采用实时荧光定量 PCR 同时检测 cDNA 产物中 tdh 基因和内标基因16 S rRNA 的 Ct 值,ΔCt 等于 tdh 的 Ct 值减去16 S rRNA 的 Ct 值,以ΔCt 值反应 tdh 相对于内标基因16 S rRNA 的转录水平。结果 24株副溶血性弧菌的 tdh Ct 值、内标基因16 S rRNA Ct值和各样本两者之差的ΔCt 值结果范围分别为18.04~25.95、8.30~10.93和8.28~15.34,ΔCt 最大值与最小值差为7.06,最高转录水平菌株为最低菌株的133倍(ΔΔCt =27.06)。结论 副溶血性弧菌 tdh 基因转录水平存在较大差异,该差异性形成的分子机制以及与该菌的致病性的关系有待进一步研究。
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