首页 期刊 预防医学 联用免疫磁珠及定量RT-PCR检测胃癌外周血微转移 【正文】

联用免疫磁珠及定量RT-PCR检测胃癌外周血微转移

作者:张新军; 郭俊明; 季峰; 秦丽君; 肖丙秀; 金之瑾; 陈健 浙江大学医学院附属第一医院; 浙江; 杭州; 310003; 宁波大学医学院; 宁波大学医学院附属医院; 宁波市医学科学研究所
免疫磁珠   胃癌   外周血微转移   淋巴细胞  

摘要:目的探讨联用免疫磁珠和定量RT-PCR检测胃癌患者外周血微转移的方法学及意义.方法首先将人胃癌MGC-803细胞以不同浓度加人到健康人外周血中,其次用淋巴细胞分离液收集单核细胞,然后等分成4份分别用4种方法处理--直接扩增(A方法)、阴性磁珠筛选(B方法)、阳性磁珠筛选(C方法)及联用阴性和阳性磁珠筛选(D方法),最后用定量RT-PCR检测β2 微球蛋白mRNA和癌胚抗原(CEA)mRNA并计算出相对CEA.mRNA值.同法测定41例胃癌、10例良性胃病患者和5例健康人外周血CEA mRNA.结果参照模型中D方法测出的相对CEA mRNA值均小于A、B和C方法测出的,其检测灵敏度为每ml血含有1个癌细胞.41例胃癌患者中用A、B、C和D方法测出的阳性例数分别为19例(46.34%)、23例(56.10%)、22例(53.66%)和27例(65.85%);D方法与A方法比较,P<0.05.D方法检测10例良性胃病均为阴性,而用其它3种方法检测有1例阳性;5例健康人均未见扩增.结论联合使用免疫磁珠阴性、阳性筛选和定量RT-PCR可提高胃癌患者外周血微转移的检出率.

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