首页 期刊 徐州医科大学学报 大鼠Somatostatin基因重组慢病毒载体的构建与检测 【正文】

大鼠Somatostatin基因重组慢病毒载体的构建与检测

作者:魏云艳; 赵莉娟; 孙蒙蒙; 王瑾; 于佳田; 王德广 徐州医学院人体解剖学教研室; 江苏徐州221004
生长抑素   神经元突触素启动子   慢病毒载体   构建  

摘要:目的克隆大鼠生长抑素somatostatin(SST)基因和神经元突触素Synapsin(Synl)的启动子序列,构建神经元特异性表达SST基因的重组慢病毒载体。方法采用RT—PCR法和PCR法分别扩增SST基因和Synl的启动子序列,并将其克隆至重组慢病毒载体系统(Lenti—EGFP),构建出以Synl启动子序列为启动子、携带SST基因的表达质粒Lenti—pSyn—SST-2A—EGFP;再将该表达质粒与pMDL、pRey和pVSVG用磷酸钙共沉淀法共转染HEK293T细胞,获得重组的慢病毒载体,将病毒注射人大鼠海马,检测EGFP和SST的表达效果。结果经测序克隆的SST和Synl启动子与GenBank上的序列相比完全一致,并测得SST重组慢病毒纯化后病毒滴度为1.5×10^9TU/ml,该病毒注射人海马可以转染神经元并表达SST。结论成功构建出以Synl启动子序列为启动子,携带SST基因的重组慢病毒载体。

注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社

学术咨询 免费咨询 杂志订阅