摘要：目的构建人类SIRT6蛋白硝基化位点突变体，用于其活性调节机制的研究。方法以野生型pCD—NA3．1-SIRT6-FLAG真核表达重组体为模板，用定点突变PCR的方法获得SIRT6的酪氨酸突变体；突变产物转化大肠杆菌DH5α进行筛选、序列测定；野生型和突变型重组体转到293H细胞，Westernblot鉴定SIRT6的表达。结果①经PCR法得到了SIRT6的突变重组体；②SIRT6突变重组体测序图谱与预期结果完全一致；③Westernblot检测野生和突变型SIRT6蛋白能表达。结论获得了能真核表达硝基化位点的突变型SIRT6蛋白的重组体。
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