首页 期刊 畜牧与兽医 牛轮状病毒RT-LAMP快速检测方法的建立 【正文】

牛轮状病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

作者:范晴; 谢芝勋; 刘加波; 庞耀珊; 邓显文; 谢志勤; 谢丽基; 彭宜
牛轮状病毒   可视化检测   扩增方法   特异性基因   灵敏度高  

摘要:本研究旨在建立一种快速可视化检测牛轮状病毒(BRV)的反转录-环介导恒温扩增方法(RT-LAMP).根据BRV的群特异性基因VP6设计一套LAMP引物,对反应条件和试剂浓度进行优化,建立了恒温(63.5 ℃)、快速(45 min)的检测方法.结果显示:所建立方法特异性好,检测其他对照病毒均为阴性;灵敏度高,最低可检测到1个拷贝的阳性质粒,扩增产物经酶切分析结果正确,扩增结果可通过观察浑浊度或加入染料后直接判定.建立了用于检测BRV的RT-LAMP方法,该方法简便、快速、特异性好、灵敏度高,适合基层和现场检测.

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