首页 期刊 畜牧与兽医 猪圆环病毒2型cap基因与猪γ-干扰素基因双表达载体的构建及稳定表达 【正文】

猪圆环病毒2型cap基因与猪γ-干扰素基因双表达载体的构建及稳定表达

作者:娄忠子; 杨彬; 兰喜; 李学瑞; 李志勇; 殷相平; 李宝玉; 柳纪省
猪圆环病毒病   cap   干扰素基因   表达载体的构建   重组  

摘要:通过PCR方法分别从含有猪圆环病毒2型(PCV-2)核衣壳蛋白(Cap)基因和猪γ-干扰素(PoIFN-γ)基因的重组克隆载体pMD18-PCV-2Cap和pMD18-PoIFN-y中扩增出Cap和PoIFN-γ的基因,将两基因亚克隆到真核表达载体pBudCE4.1中,构建重组真核双表达载体pBud-IFNPCV.重组质粒转染BHK-21细胞后进行ZeocinTM抗性筛选建立细胞系,阳性细胞通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot检测cap和PoIFN-y在BHK-21细胞中的表达.结果显示,试验中筛选出1株ZeocinTM抗性阳性BHK-21细胞,cap和PoIFN-γ均在该细胞中获得稳定高效表达,这将为猪圆环病毒病的防治提供新的方法.

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