摘要:目的:构建核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB) p65亚基特异的核糖核酸干扰腺病毒表达载体,验证其对p65亚基的沉默效应.方法:设计针对大鼠NF-κB p65亚基的不同干扰序列,通过质粒将其导入腺病毒,感染大鼠心肌细胞(H9C2).将感染后的心肌细胞通过RT-PCR方法和Western Blot方法检测各组NF-κB p65的基因水平表达和蛋白质水平表达.结果:成功构建了NF-κB p65亚基特异的RNAi腺病毒表达载体,获得高滴度的腺病毒液;RNAi腺病毒感染H9C2细胞后可以高效抑制NF-κBp65蛋白的表达.结论:RNAi技术能有效的沉默大鼠心肌细胞NF-κB p65的表达.
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