首页 期刊 现代食品科技 传统食品发酵环境宏基因组中酯酶基因的克隆、表达及性质分析 【正文】

传统食品发酵环境宏基因组中酯酶基因的克隆、表达及性质分析

作者:叶茂; 邓毛程; 刘慧平; 李静 广东轻工职业技术学院食品与生物技术学院、广东高校特色调味品工程技术开发中心; 广东广州510300
传统食品   宏基因组   酯酶   克隆   性质  

摘要:微生物酯酶是一种广泛应用于食品、医药和精细化工等领域的工业化酶。为了丰富酯酶资源,本文通过提取我国传统发酵食品环境样品总基因组DNA,构建宏基因组文库,从中筛选获得一个新的酯酶基因(est115),该基因全长948 bp,编码316个氨基酸,其蛋白序列同源性分析,表明与来自Pseudomonas lutea的羧酸酯水解酶同源性最高为38%,显示酯酶Est115属于新的酯酶类。然后构建了est115基因重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,经纯化得到重组酯酶Est115。酶学性质的分析表明,该重组酯酶Est115对酰基碳链较短的对硝基苯酚酯具有较高的催化活性,最适作用温度为35℃,最适p H值为7.0,在10%~18%Na Cl条件下,酶蛋白可保持较高的催化活性,具有良好的耐盐性,提示该酶可以应用在高渗透压食品加工中,是一个新型的极具潜力的酯酶。

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