摘要:本文通过研究酶组合、酶浓度、酶作用时间和菌龄等因素对天麻素产生菌华根霉(Rhizopus chinensis)LN—A原生质体制备和再生的影响,总结出了原生质体制备和再生的最佳条件:选用对数生长期的菌株,以蜗牛酶5mg/mL+纤维素酶5mg/mL+溶菌酶2mg/mL30℃保温处理2h,原生质体形成率达5.8×10^7,原生质体再生率为5.7%。在此基础上首次利用He—Ne激光、紫外线复合诱变天麻素合成菌的原生质体,当选用15mw的He-Ne激光辐射原生质体20min,再用紫外辐照150S时获得了转化率及天麻素得率都明显提高的突变株,其天麻素得率比出发菌株提高20%以上.
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