首页 期刊 微生物学通报 利用定点突变分析海藻糖合酶的功能 【正文】

利用定点突变分析海藻糖合酶的功能

作者:王宇凡; 朱玥玥; 魏东盛; 张峻; 邢来君; 李明春 南开大学微生物学系分子微生物学与技术教育部重点实验室; 天津300071; 天津市林业果树研究所; 天津300112
海藻糖合酶   定点突变   序列比对   三维模型构建  

摘要:我们通过对来自红色亚栖热菌(Meiothermus ruber)CBS.01中的海藻糖合酶(Trehalose synthase)序列比对及三维模型构建,我们构建了D200G/H165R,R227C,R392A三个定点突变体,检测其对麦芽糖及海藻糖的转化能力。结果发现:在50℃时,D200G/H165R、R392A基本失去其原有活性,而R227C产生海藻糖的能力降低。37℃时,D200G/H165R失去转化能力,而R392A及R227C保有部分能力。因此我们推测,R392位点可能是维持酶的结构及热稳定性的关键位点,而D200位点在反应过程中也起重要作用。

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