摘要:目的建立一种能够快速、灵敏、特异的鉴定腐皮镰刀菌的SYBRGreen实时荧光定量PCR。方法运用SYBRGreen实时荧光定量PCR反应体系检测腐皮镰刀菌,并对此方法的特异性、灵敏度和稳定性进行评价。结果通过对45例样品的检测,结果显示SYBRGreen实时荧光定量PCR特异性好,其检出率高于普通PCR;灵敏度高,对重组质粒标准品的检测灵敏度为1.O×l0^2copies/μL;稳定性好,对质粒为1.O×10^7copies/p.L、1.O×l0^5copies/IxL、1.0×10^3copies/μL的标准品重复检测10次,结果显示扩增反应Ct值的变异系数为0.96%。1.68%。结论SYBRGreen实时荧光定量PCR检测腐皮镰刀菌,不仅特异性好,灵敏度高,稳定性好,而且简便、快速、易操作。
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