摘要:利用RT-PCR技术从传染性法氏囊病病毒(IBDV)TL2004株感染鸡胚尿囊液中扩增到VP5 基因,进而构建了T7 启动子控制下的N 端GST-Tag 融合表达质粒pGEX-VP5.序列测定表明VP5基因全长438bp,编码一个由145个氨基酸组成的VP5蛋白.将pGEX-VP5转化大肠杆菌BL21,在IPTG的诱导下高效表达了GST-VP5融合蛋白(44kD).通过包涵体纯化的方法,获得的较高纯度的融合蛋白,免疫新西兰兔,Western blot和ELISA分析表明,制备的融合蛋白抗血清效价在1∶12800以上,并具有良好的免疫反应特异性,为进一步研究VP5 在IBDV复制与致病中的作用,以及研制IBDV VP5基因缺失疫苗打下了良好的基础.
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