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手足口病病原体EV71的检测方法学比较

作者:付辉; 安丽娜; 彭碧波 武警总医院灾害救援医学研究所; 北京100039
手足口病   肠道病毒71型   细胞病变效应   实时荧光定量聚合酶链式反应   免疫荧光  

摘要:目的比较4种不同的方法对手足口病(hand-foot and mouth disease,HFMD)病原体肠病毒71型(enterovirus type 71,EV71)感染的检测效果。方法非洲绿猴肾细胞(Vero)培养至对数生长期后,加入EV71病毒株感染。分别采用细胞病变效应法(cytopathic effect,CPE)、实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,Real-Time PCR)、Western blot和免疫荧光法检测病毒感染情况,并对4种检测结果进行比较。结果 4种方法均可检测到EV71的感染,其中CPE最经济实惠,但是检测周期长,需要至少96 h,并且对病毒活力要求高;Western blot和免疫荧光检测相近,72 h即可完成实验,但灵敏度低,对病毒量有一定要求;Real-Time PCR检测既快速灵敏性又高,48 h即可完成实验。结论不同的方法各有其优缺点,需要根据不同的需要进行选择,达到快速准确诊断病原体的目的。

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