首页 期刊 生殖医学 HCG在小鼠卵母细胞体外受精胚胎发育过程中的作用 【正文】

HCG在小鼠卵母细胞体外受精胚胎发育过程中的作用

作者:邢雅欣; 解其贵; 杨志勇; 刘玉兵; 王玲; 千日成 南通大学医学院; 南通226000; 上海市第十人民医院生殖医学中心; 上海200072
人绒毛膜促性腺激素   小鼠胚胎   体外发育  

摘要:目的 探讨HCG在小鼠卵母细胞体外受精胚胎发育过程中的作用。方法 选择性成熟4~6周ICR雌性小鼠进行促排卵,体外受精并培养至96h。在受精液及胚胎培养液中分别加入HCG浓度为0U/L(对照组)和1 500U/L(HCG组),对两组的体外受精率、2-细胞分裂率及囊胚形成率进行比较;用实时定量PCR法(qPCR)比较两组4个囊胚质量相关基因mRNA的表达水平,包括多能性相关基因八聚体结合蛋白4(Oct4)、分化相关基因尾端型同源盒2(Cdx2)、氧化应激相关基因锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、侵袭相关基因基质金属蛋白酶9(Mmp9);采用免疫荧光法,对两组囊胚进行Cdx2蛋白标记,并用DAPI染色料标记所有细胞的细胞核,在激光共聚焦显微镜下对细胞总数、内细胞团(ICM)、外滋养层(TE)细胞数目进行计数并比较。结果HCG组的受精率(95.6%)、2-细胞率(96.6%)以及囊胚形成率(83.9%)与对照组(分别为95.8%,96.0%,81.6%)相比较,差异无统计学意义(P〉0.05);HCG组相关基因Cdx2、MnSOD mRNA的表达水平显著高于对照组(P〈0.05);与对照组相比,HCG组Mmp9基因mRNA表达水平显著上调(P〈0.01);两组的Oct4基因mRNA表达水平无显著性差异(P〉0.05);HCG组囊胚细胞总数(61.7±16.3)显著高于对照组(52.3±9.1)(P〈0.05),HCG组ICM细胞数(15.4±3.8)及TE细胞数(46.2±13.1)多于对照组[分别为(13.2±3.9)和(39.1±7.8)],但差异无统计学意义(P〉0.05);两组ICM/TE值相比较,差异也无统计学意义(P〉0.05)。结论 胚胎培养液中加入HCG增加囊胚细胞总数及某些质量相关基因的表达,提高体外发育潜能,HCG具有潜力成为优化植入前胚胎培养体系的有益成分。

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