摘要:目的:构建针对MMP9基因的特异性锤头状核酶真核表达载体,探讨其对子宫内膜异位细胞侵袭力的抑制作用。方法:运用计算机软件人工设计并合成核酶基因,将核酶基因克隆到真核表达载体peDNA3.1中,阳性重组子由BamHI和EeoRI酶切,琼脂糖凝胶电泳鉴定证实。将重组质粒转染入子宫内膜异位细胞中,transwell小室法检测重组质粒对子宫内膜异位细胞侵袭力的抑制作用。结果:经酶切电泳证实合成的核酶基因序列正确并已被准确克隆入pcDNA3.1的BamHI和EcoRI酶切位点之间,命名为pcDNA3.1一RZ。Westernblot显示转染核酶的靶细胞中MMP9蛋白的表达显著下降;transwell小室法显示pcDNA3.1一Rz可明显抑制子宫内膜异位细胞的侵袭力。结论:pcDNA3.1一RZ能明显抑制子宫内膜异位细胞的侵袭性生长,这种作用可能与MMP9蛋白的表达下调有关。
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