首页 期刊 生物技术通讯 t-PA突变体山羊乳腺表达载体构建及转染细胞的核移植试验 【正文】

t-PA突变体山羊乳腺表达载体构建及转染细胞的核移植试验

作者:杨正田; 兰国成; 沈伟; 吴晓洁; 徐秀英; 谭景和; 邓继先 军事医学科学院; 生物工程研究所; 北京; 100071; 山东农业大学; 动物科技学院; 泰安; 271018; 军事医学科学院; 生物工程研究所; 北京; 100071; 西北农林科技大学; 动物科技学院; 杨凌; 712100
乳腺表达   转染细胞   首次   羊胎   阳性细胞  

摘要:构建了t-PA突变体山羊乳腺特异表达载体pGBCt-PAm,包括长4.1 kb的山羊β-酪蛋白启动子以及启动子前2.4kb的鸡β-珠蛋白绝缘子序列;并检测了表达载体在家兔乳腺的瞬间表达,验证了载体的有效性.通过电击和脂质体2种转染方式转染了山羊胎儿成纤维细胞(GFFC),经过筛选检测,得到了7株能大量扩增的PCR阳性细胞株.其中的2株(M9,M10)已经进行了首次细胞核移植和胚胎移植试验,2只受体羊2个情期未见返情.

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