首页 期刊 生物技术通讯 重组人IL-1ra在大肠杆菌中的可溶性表达 【正文】

重组人IL-1ra在大肠杆菌中的可溶性表达

作者:杨志新; 周晓巍; 朱恒奇; 徐秀英; 黄培堂 军事医学科学院; 生物工程研究所; 北京; 100071
大肠杆菌   蛋白   超声   elisa   表达质粒  

摘要:利用PCR技术从含有IL-1ra的质粒上扩增IL-1ra基因,经过序列测定后插入表达载体pTIG-Trx,并转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达.经SDS-PAGE分析显示,IL-1ra表达质粒在大肠杆菌中的诱导表达产物出现相对分子量大约为17 000的一条新生蛋白质带,其大小与预期结果一致,经Westem和ELISA分析,证明该带即为目的蛋白,SDS-PAGE显示目的蛋白全部以可溶性蛋白的形式存在.超声破碎后,上清经金属螯和层析纯化获得纯度约为98%的蛋白样品.

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