首页 期刊 生物技术通报 黑曲霉β-甘露聚糖酶基因manA在PK15细胞中的分泌表达 【正文】

黑曲霉β-甘露聚糖酶基因manA在PK15细胞中的分泌表达

作者:邹娴; 张茂; 许惠; 林纯; 贺晓燕; 刘德武; 蔡更元; 吴珍芳 华南农业大学动物科学学院; 广州510642; 广东省农业科学院畜牧研究所; 广州510600
黑曲霉   重叠延伸pcr   pk15细胞  

摘要:通过RT-PCR方法,从黑曲霉总RNA中克隆出β-甘露聚糖酶基因manA的成熟肽编码序列。将其与猪腮腺分泌蛋白(parotid secretory protein,PSP)基因的信号肽序列通过重叠延伸PCR方法得到拼接片段,并插入到真核表达载体pcD-NA6.0/HisTMA中,得到重组质粒pcDNA-PSmanA。重组质粒经过PCR、酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且读码框完全正确。在脂质体介导下将pcDNA-PSmanA转染猪肾(PK15)细胞进行分泌表达,通过RT-PCR方法证实其在PK15细胞中表达,并在细胞培养液中检测酶活性得到β-甘露聚糖酶基因酶活性为14.5 IU/mL。

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生物技术通报

影响因子:0.88

期刊级别:北大期刊

发行周期:月刊