首页 期刊 生物化工 电穿孔转染悬浮细胞KM933及1301方法的建立及优化 【正文】

电穿孔转染悬浮细胞KM933及1301方法的建立及优化

作者:朱双; 朱晓芹; 孙英杰; 冷心怡; 刘江东 武汉大学生命科学学院
km933细胞   1301细胞   电穿孔   条件优化  

摘要:采用电穿孔法将p EGFP-N1质粒转染KM933及1301细胞,优化控制电穿孔条件电压(Voltage)或者电容(Capacitance)参数,经过两轮单一变量优化试验,得出KM933细胞系最佳转染电压V(optimal)为185V、电容C(optimal)为700μF,48h转染效率约为35%,存活率约为70%;1301细胞系最佳转染电压V(optimal)为185V、电容C(optimal)为600μF,48h转染效率约为20%,存活率约为65%。该实验方法操作简单,实验成本低,转染效果好,可用于脂质体等常规方法难以转染细胞的外源基因导入,为进一步研究其他基因转移到KM933及1301细胞提供实验方法奠定技术基础。

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