首页 期刊 食品与生物技术学报 重组大肠杆菌生产海藻糖合酶发酵工艺优化 【正文】

重组大肠杆菌生产海藻糖合酶发酵工艺优化

作者:张悦; 宿玲恰; 吴敬 食品科学与技术国家重点实验室; 江南大学; 江苏无锡214122; 江南大学生物工程学院; 江苏无锡214122
海藻糖合酶   高效表达   基因工程菌   发酵罐   高温处理  

摘要:为了实现来源于嗜热栖热菌的海藻糖合酶的高效表达,对E.coli BL21(DE3)/pET24a(+)-TreS基因工程菌在3 L发酵罐进行了发酵工艺优化,获得的最优发酵条件为:诱导温度32 ℃,当OD600达到50时以0.2 g/(L·h)的速率补加乳糖进行诱导产酶,在该条件下发酵35 h时酶活达到472 U/mL,是优化前的2.3倍;进而采用该条件在30 L发酵罐进行了初步放大研究,酶活达到356 U/mL。由于该海藻糖合酶热稳定性好,因此尝试了高温处理破碎E.coli细胞以释放海藻糖合酶,结果表明,80 ℃处理30 min,海藻糖合酶的得率可达72.3%,具有工业化应用前景。

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