摘要:以巢湖水华新鲜蓝藻为处理对象,采用分段盐析法纯化获得了医药级藻蓝蛋白。并通过紫外-可见分光光度法对每一步盐析获得的藻蓝蛋白和杂质液进行光谱扫描,辅助确定每一步盐析(NH_4)_2SO_4的最佳投加量。结果表明,六步盐析中奇数次盐析(NH_4)_2SO_4浓度可选择1.0 mol/L,偶数次盐析(NH_4)_2SO_4浓度可选择1.8 mol/L。光谱扫描进一步发现,一步盐析作用机制在于去除了少量的细胞壁残渣、少量核酸类物质、维生素类和杂蛋白等浅黄色物质,二步盐析能大量去除核酸类和维生素类物质,三步盐析能继续去除少量核酸类和部分其他蛋白质,四步盐析进一步去除其他蛋白对藻蓝蛋白的影响,五步和六步盐析纯化作用并不明显,不能同时将这2种性质相近的蛋白质分离开。所得藻蓝蛋白纯度为3.71,回收率可达45.98%。
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