首页 期刊 食品科技 谷氨酸棒杆菌ATCC14067海藻糖合酶基因的克隆及功能鉴定 【正文】

谷氨酸棒杆菌ATCC14067海藻糖合酶基因的克隆及功能鉴定

作者:徐燕杉; 赵难难; 都心怡; 郑穗平 华南理工大学生物科学与工程学院; 广东省发酵与酶工程重点实验室; 广东省生物酶与工业绿色加工工程技术研究中心; 广州510006
海藻糖   酶法制备   海藻糖合酶   高效液相色谱  

摘要:海藻糖分子是由2个吡喃葡萄糖环以α,α-1,1-糖苷键连接而成的一种十分稳定的非还原二糖,由于其特殊的生物学保护功用,广泛应用于医药、化妆品、食品等多个领域,具有很好的市场前景。目前,海藻糖的生产方法以生物酶法制备为主。其中,利用Tre Y-Tre Z途径由淀粉生产海藻糖和利用Tre S途径由麦芽糖生产海藻糖最为经济可行。针对谷氨酸棒杆菌ATCC14067的海藻糖合酶基因(tre S)进行基因克隆,将其插入表达质粒p ET-22b,在宿主菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,成功得到特异表达的目的蛋白。经高效液相色谱检测证实,该重组酶作用于麦芽糖后,可以产生海藻糖,具有海藻糖合酶的相应活性。在最适反应条件(30℃,p H7.5)下海藻糖合酶的转化效率可达60%~70%。实验系统地对谷氨酸棒杆菌ATCC14067的海藻糖合酶基因进行了异源表达及酶学性质的研究,为其大规模生产及工业化应用奠定了基础。

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