摘要:目的:研究反义Snail转录因子体外抑制肝癌转移的作用. 方法:采用RT—PCR技术分别检测肝癌细胞株HepG2中Snail mRNA和E钙黏蛋白(E—cadherin)mRNA的表达水平.将HepG2细胞分为转染反义Snail质粒(反义组)和空载体质粒(对照组),观察Snail对E—cadherin mRNA表达的逆转作用及对肝癌细胞体外侵袭、运动的抑制作用. 结果:Snail mRNA在HepG2细胞中有表达,E-cadherin mRNA在HepG2细胞中没有表达.HepG2细胞瞬时转染0,24,48h时,Snail mRNA的表达水平分别为0.887±0.005,0.665±0.010,0.348±0.012:同时,E-cadherin mRNA开始有表达,分别为0,0.160±0.001,0.299±0.005,各时间点间分别比较,有显著性差异CP〈0.05).HepG2细胞稳定转染后,反义组、对照组Snail mRNA表达水平分别为0.131±0.010,0.3577±0.020,两组比较有显著性差异(P〈0.05):反义组E—cadherin mRNA开始有表达,表达水平为0.476±0.030,而对照组为0,两组比较有显著性差异(P〈0.01);检测间质细胞标志物纤维连接蛋白mRNA的表达水平,反义组显著低于对照组(0.202±O.010 vs 0.558±0.010,P〈0.01).体外细胞运动实验表明,反义组、对照组跨膜细胞数分别为(48±2)个和(401±17)个,有显著性差异(P〈0.01).重组细胞基底膜侵袭实验显示,两组穿透基底膜细胞数分别为(39±8)个和(211±61)个,显著性差异(P〈0.05). 结论:肝癌细胞中存在Snail mRNA与E-cadherin mRNA表达的负向关系,抑制Snail mRNA的表达对肝癌细胞的侵袭和运动有抑制作用,可能为肝癌的基因治疗提供新的靶点.
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