首页 期刊 世界华人消化 乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及人肝细胞株HL-7702转染 【正文】

乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及人肝细胞株HL-7702转染

作者:陈红英; 唐南洪; 张生君; 陈治新; 王小众 福建医科大学附属协和医院消化内科; 福建省福州市350001; 福建医科大学附属协和医院肝胆外科; 福建省福州市350001
乙肝病毒   x基因   真核表达载体   脂质体转染法   肝癌  

摘要:目的:构建表达乙肝病毒(HBV)X基因的人肝细胞株.方法:用PCR法扩增HBV X基因序列,将其添A后连至PUCmT载体上,用EcolⅠ和HindⅢ双酶切PUCmT-X和PcDNA3载体,连接酶切片段PcDNA3及X片段以构建重组质粒PcDNA3-X.用脂质体转染法将PcDNA3-X及空质粒PcDNA3导入肝细胞HL-7702中,G418选择培养,RT—PCR鉴定其稳定表达.结果:已构建的PcDNA3-X经序列测定含有完整的HBVX基因片段,转入HL-7702细胞后经RT-PCR证实该细胞有稳定表达X蛋白。结论:成功构建了表达HBV X基因的肝细胞株,为进一步探讨HBV X基因在肝炎与肝癌发生中的作用提供了理想的实验模型。

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