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健脾软肝方对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠肝窦基底膜形成的影响

作者:陈文玲; 杜良; 陈文慧; 谭丽萍; 姚政; 石安华 云南中医学院; 昆明650500; 本溪市第九人民医院
肝纤维化   健脾软肝方   层黏连蛋白   基底膜   大鼠  

摘要:目的探讨健脾软肝方对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝窦基底膜形成的影响。方法选择雄性Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、扶正化瘀胶囊组及健脾软肝方高、中、低剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组腹腔注射30%CCl4橄榄油溶液2 mL/kg,每周2次,连续注射4周;造模同时,健脾软肝方高、中、低剂量组分别给予健脾软肝方10.8、5.4、2.7 g/(kg·d)灌胃,扶正化瘀胶囊组给予扶正化瘀胶囊0.4 g/(kg·d)灌胃,正常对照组和模型组给予生理盐水15 mL/(kg·d)灌胃,连续灌胃4周。末次灌胃结束,取肝组织,采用Mallory染色法观察各组肝纤维化程度,透射电镜下观察各组肝窦基底膜超微结构;采用Real-time PCR法检测肝组织Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)、层黏连蛋白(LN)mRNA表达,采用免疫组化ABC法检测肝组织LN蛋白表达。结果与模型组相比,扶正化瘀胶囊组及健脾软肝方高、中、低剂量组肝组织中胶原纤维沉积减少,面积相对减小,分割包绕程度减轻;扶正化瘀胶囊组及健脾软肝方高、中、低剂量组肝窦内皮下基底膜不完整,Disse间隙内胶原纤维较少,均较模型组有所改善。与模型组比较,健脾软肝方中剂量组和扶正化瘀胶囊组ColⅣmRNA相对表达量明显降低(P〈0.05),而健脾软肝方高、低剂量组虽然ColⅣmRNA相对表达量降低,但差异无统计学意义(P均〉0.05)。健脾软肝方高、中、低剂量组ColⅣmRNA相对表达量两两比较P均〉0.05。扶正化瘀胶囊组及健脾软肝方高、中、低剂量组均可降低LN mRNA及蛋白表达(P均〈0.05),但扶正化瘀胶囊组、健脾软肝方高剂量组比健脾软肝方低剂量组降低更明显(P均〈0.05),其他组间两两比较P均〉0.05。结论健脾软肝方能通过延缓肝纤维化大鼠肝组织基底膜形成,发挥抗肝纤维化作用;其作用机制可能与降低肝组织ColⅣ、LN表达有关�

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