首页 期刊 山东医药 丁胱亚磺酰亚胺对正常肝细胞的毒性作用及其机制探讨 【正文】

丁胱亚磺酰亚胺对正常肝细胞的毒性作用及其机制探讨

作者:王圆; 关溯 华南理工大学生物科学与工程学院; 广州510006
丁胱亚磺酰亚胺   肝细胞   细胞存活率   谷胱甘肽合成酶   p38蛋白  

摘要:目的探讨丁胱亚磺酰亚胺(BSO)对人胚正常肝细胞株L-02的毒性及其机制。方法 (1)用0、10、25、50、100和200μmol/L的BSO孵育L-02细胞48 h,用MTT法测算细胞存活率。(2)用0、10、25、50、100、200μmol/L的BSO培养L-02细胞48 h,用DTNB法检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)水平。(3)用200μmol/L的BSO培养L-02细胞0、2、12、24、36、48 h,用Western blotting法测算细胞p38磷酸化水平。(4)用200μmol/L的BSO培养L-02细胞0、2、6、12、24、48 h,用荧光探针H2DCFDA法测算细胞活性氧簇(ROS)水平。(5)L-02细胞分为对照组、BSO组、SB203580组和BSO+SB203580组。对照组不加任何药物;BSO组加入终浓度为200μmol/L的BSO;SB203580组加入终浓度为20μmol/L的SB203580;BSO+SB203580组先加入终浓度为20μmol/L的SB203580孵育15 min后加入终浓度为200μmol/L的BSO。24 h后采用MTT法测算各组细胞存活率,采用荧光探针H2DCFDA法检测ROS水平。结果 (1)从50μmol/L开始,BSO可以剂量相关性地降低L-02细胞的存活率(P均〈0.05)。(2)BSO可剂量相关性地降低L-02细胞GSH含量,BSO浓度为25μmol/L时达到最低值。(3)BSO呈时间依赖性增加L-02细胞内p38磷酸化水平(P均〈0.05)。(4)加入BSO后L-02细胞ROS水平均较对照组提高(P均〈0.05),培养24 h时达到高峰。(5)BSO组L-02细胞ROS水平高于对照组(P〈0.05),细胞存活率低于对照组(P〈0.05);SB203580组L-02细胞ROS水平和细胞存活率与对照组相比P均〉0.05;BSO+SB203580组L-02细胞ROS水平低于BSO组(P〈0.05),细胞存活率高于BSO组(P〈0.05)。结论 BSO对人正常肝细胞具有毒性作用,其机制可能是通过促进p38磷酸化和ROS生成,降低GSH水平实现的。

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