首页 期刊 山东农业科学 黄瓜绿斑驳花叶病毒外壳蛋白基因原核表达及抗血清制备 【正文】

黄瓜绿斑驳花叶病毒外壳蛋白基因原核表达及抗血清制备

作者:刘锦; 李亦晴; 黄显德; 房乐; 李向东; 田延平 山东农业大学植物保护学院植物病理学系; 山东泰安271018; 北京林业大学生物科学与技术学院; 北京100083
黄瓜绿斑驳花叶病毒   外壳蛋白基因   原核表达   抗血清  

摘要:将黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV上获得pEHISTEV-CGMMV-CP,转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导,表达出分子量为19.5 kD的CGMMV CP融合蛋白。切胶回收诱导表达的CGMMV CP免疫家兔,制备抗血清。Western Blotting检测发现,制备的抗血清能与CGMMV CP发生特异性免疫反应,与同属的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)无反应。琼脂双扩散试验测定,制备抗血清的效价为1∶16,ELISA测定效价为1∶1024。该血清特异性强、效价高,可用于CGMMV的检测。

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