首页 期刊 热带医学 HBV转录激活蛋白HBx、MHBs^t78MHBs^t155真核重组载体构建 【正文】

HBV转录激活蛋白HBx、MHBs^t78MHBs^t155真核重组载体构建

作者:杨林; 江元森; 陈幼明; 李志刚; 李刚; 陈文思; 姚集鲁 中山大学附属第三医院传染科,广州510630
乙型肝炎病毒   hbv   x蛋白   羧基端截断的中分子hbv表面蛋白  

摘要:目的 分别构建人乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白、羧基端截断的中分子表面蛋白MHBs^178、MHBs^t155编码基因的真核重组表达载体,以便进一步研究其转录激活功能及对宿主细胞信号传导通路的影响。方法 设计合成3对寡核苷酸引物,以adr亚型HBV质粒pHBV DNA为模板,采用PCR法分别扩增HBVX基因、MHBs^178和MHBs^t155编码基因片段;用HindⅢ,Kpn Ⅰ双酶切HBV X基因;用HindⅢ和Barn HⅠ双酶切MHBs^178与MHBs^t155编码基因片段后,分别定向插入到真核表达载体pcDNA3.1相应酶切位点,转化宿主菌JM109,提取质粒,分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒。结果 酶切重组体显示所切下的片段大小均与预计相符,测序结果与文献报道序列及预计结果一致。结论 成功构建了HBV X基因、羧基端截断的HBV中分子表面蛋白MHBs^178、MHBs^t155编码基因的真核重组表达载体,为进一步研究HBV转录激活蛋白HBx、MHBs^178 MHBs^t155对宿主细胞信号转导通路的影响奠定基础。

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