首页 期刊 热带亚热带植物学报 澳洲坚果SCoT反应体系的建立及应用 【正文】

澳洲坚果SCoT反应体系的建立及应用

作者:蔡元保; 杨祥燕; 陈显国; 曾黎明; 郭凌飞; 林玉虹; 崔明勇 广西亚热带作物研究所; 南宁530001; 厦门市农业机械监理所; 福建厦门361009
澳洲坚果   scot   单因素试验   体系优化   dna指纹图谱  

摘要:为建立澳洲坚果(Macadamia spp.)的SCoT最适反应体系,用单因素设计方法对影响SCoT-PCR反应体系的主要影响因素进行了优化筛选,并构建了澳洲坚果种质的指纹图谱。结果表明,澳洲坚果的SCoT最适反应体系为:反应体系总体积为20此,包含2.5mmol L^-1Mg^2+,0.3mmol L^-1 dNTPs,0.8μmol L^-1引物,40mg L^-1模板DNA和1.0UTaq DNA聚合酶。最适退火温度为50℃。该反应体系对澳洲坚果种质具有良好的稳定性、可靠性和较高的分辨率。选用多态性良好的单引物SC5和引物组合SC34+SC39,可以将12份澳洲坚果种质完全区分开,每份种质都各有独特的指纹图谱,置信概率达到99.988%。构建的SCoT反应体系可为澳洲坚果种质鉴定和遗传多样性分析等提供技术支持。

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