首页 期刊 热带亚热带植物学报 矮牵牛F3′,5′H全长cDNA的克隆及花特异启动子介导表达载体的构建 【正文】

矮牵牛F3′,5′H全长cDNA的克隆及花特异启动子介导表达载体的构建

作者:王琳; 向太和 杭州师范大学生命与环境科学学院; 杭州310036
矮牵牛   克隆   花特异性启动子   表达载体  

摘要:通过RT—PCR从蓝色矮牵牛(Petunia hybrida)花瓣中克隆类黄酮-3′,5′-羟基化酶基因(F3′,5′H)全长cDNA(GenBank登记号EF371021)。生物信息学分析表明克隆的F3′,5′H基因与GenBank登记号D14588、Z22545和DQ352142等的F3′,5′H基因序列高度一致;其编码的氨基酸序列与GenBank登记号BAA03438.1(矮牵牛)、BAC10997.1(银杯草)和AAV85470.1(马铃薯)的高度同源,同源率分别为99%、88%和87%。利用pBIN19、pBluescriptsKn和pMD18-PchsA质粒成功构建了花特异性启动子PchsA驱动的F3′,5′H基因的表达载体pBIN19-PchsA-F3′5′H,并导入到野生型发根农杆菌K599中。利用K599诱导菊花生根,不定根的诱导率可达30.7%。这为利用转基因技术创造蓝色花卉提供了重要的基础。

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