首页 期刊 热带亚热带植物学报 红锥基因组RAPD反应体系的建立和优化 【正文】

红锥基因组RAPD反应体系的建立和优化

作者:徐斌; 张方秋; 潘文; 朱报著 广东省林业科学研究院; 广州510520
红锥   dna提取   rapd   体系优化  

摘要:以红锥(Castanopsis hystrix A.DC.)嫩叶为材料,应用改良的CTAB方法成功提取了红锥基因组DNA,并对影响随机扩增多态DNA(RAPD)反应的各因素进行了优化,建立了红锥RAPD的优化反应体系及程序。在25μl反应体系中,模板DNA0.8ng μl^-1,10×Buffer 2.5μl,Mg^2+ 2.0mmol/L,Taq DNA聚合酶0.8 U,dNTPs 0.35mmol/L,随机引物S420.28μmol/L。PCR循环程序为:94℃预变性3min,然后94℃ 30s,39℃ 1min,72℃ 2min,35个循环,最后72℃延伸10min,4℃保存。

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