首页 期刊 农业生物技术学报 巨桉锌指结构蛋白基因EgrZFP7在低温胁迫中的功能研究 【正文】

巨桉锌指结构蛋白基因EgrZFP7在低温胁迫中的功能研究

作者:倪晓详; 王晓荣; 陆军; 从青; 程龙军 浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室; 杭州311300
锌指蛋白   基因功能   巨桉   低温胁迫  

摘要:锌指结构蛋白(zinc finger protein, ZFP)是一类在植物生长、发育和逆境胁迫响应中发挥重要作用的转录因子。为了挖掘桉树(Eucalyptus)抗寒分子响应中的重要基因资源,为桉树抗低温分子辅助育种提供理论依据,本实验对巨桉(Eucalyptus grandis)在低温处理下受到强烈诱导表达的锌指结构蛋白基因EgrZFP7(Eucalyptus grandis zinc finger protein 7)编码蛋白结构及其功能进行了研究。该基因是典型的C2H2型锌指结构蛋白基因,编码蛋白序列中含有2个锌指结构基序、1个L-Box基序和1个乙烯响应元件结合因子(ethylene response factor, ERF)相关双性抑制子(ERF-associated amphiphilic repression, EAR)基序。通过构建EgrZFP7∷GFP表达载体,用基因枪轰击洋葱表皮的方法,进行基因表达蛋白的亚细胞定位,结果表明,EgrZFP7表达蛋白定位于细胞核。构建35S∷EgrZFP7超表达载体,转化拟南芥(Arabidopsis thaliana),得到超表达转基因纯合株系EgrZFP7-OX1和EgrZFP7-OX2。与野生型相比,其正常生长条件下侧根的数目和长度增加。以-8 ℃低温处理3 d、再缓苗恢复3 d,结果显示,超表达转基因株系恢复速度慢,同时幼苗因受低温胁迫的死亡率远高于野生型,说明该基因超表达增加了拟南芥转基因植株的低温敏感性。酵母双杂交文库中筛选到1个与EgrZFP7互作的乙烯响应因子蛋白EgrERF4(Eucalyptus grandis ethylene response factor 4)。上述研究结果表明,EgrZFP7可能通过与乙烯响应因子的相互作用,在巨桉低温胁迫响应中发挥负调控。本研究为进一步了解桉树抗寒分子机理提供了基础资料。

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