首页 期刊 农业生物技术学报 二穗短柄草BdDREB38基因的表达模式及其启动子的克隆与功能鉴定 【正文】

二穗短柄草BdDREB38基因的表达模式及其启动子的克隆与功能鉴定

作者:陈利红; 李丽丽; 张亚男; 张文昊 江汉大学系统生物学研究院; 武汉430056
二穗短柄草   bd   dreb38基因   启动子   干旱诱导型  

摘要:AP2/EREBP(APETALA2/ethylene-responsive element binding protein)转录因子是植物中最大和最保守的基因家族之一,在植物生长、发育和极端温度(冻害、热胁迫)、干旱、高盐和病原体感染等多种逆境胁迫应答过程中发挥着重要作用,同时还参与了各种激素相关的信号转导通路。该转录因子超家族可分为4个亚类,即乙烯应答因子(ethylene-responsive factor,ERF),干旱应答元件结合蛋白(dehydrationresponsive element binding protein,DREB),RAV(related to ABI3/VP1)和AP2。其中DREB亚类转录因子在高等植物应答干旱、高盐和低温胁迫中发挥着重要作用。前期对二穗短柄草(Brachypodium distachyon)AP2/EREBP基因超家族进行分析时,发现DREB亚类中的Bd DREB38基因受到冷胁迫诱导,而其在其他几种非生物胁迫及其启动子的表达模式尚不清楚。本研究利用q RT-PCR首先检测了Bd DREB38基因冷、干旱、盐、脱落酸(abscisic acid,ABA)、水杨酸(Salicylic acid,SA)和H2O2几种非生物胁迫条件下的表达模式。结果表明:在Na Cl和H2O2处理的各个时间点,Bd DREB38基因的表达量与对照差异不大;而在干旱处理条件下,Bd DREB38基因的表达量随着处理时间的延长而逐渐上升。此外,冷处理2 h与ABA处理1 h,Bd DREB38基因的表达量显著高于对照,而在SA处理5 h时,Bd DREB38基因的表达量有所下降。这些结果暗示了Bd DREB38基因的启动子有可能是一个逆境胁迫响应启动子。为了进一步分析Bd DREB38基因的启动子结构与功能,本研究利用PCR的方法克隆了该基因上游1 510 bp的启动子区域(命名为PBd DREB38)。Plant CARE启动子在线分析表明:PBd DREB38不但含有TATA-box、CAAT-box基本的顺式作用元件,同时还含有LTR、HSE、TC-rich repeats、TCA、SP1等多种胁迫及光响应相关元件。为验证该启动子的表达特性,将PBd DREB38启动子连接到p CAMBIA1381-GUS载体上,并通过农杆菌(Agroba

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