摘要：目的 在乙型肝炎病毒（HBV）相关性肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中探讨乙肝病毒x蛋白（HBx）对骨桥蛋白（osteopontin,OPN）表达及肝癌细胞干性的影响。方法 采用免疫印迹（Western blot,WB）及免疫组化等方法在肝癌组织标本上检测OPN表达水平与患者性别、年龄、AFP、HBV病毒复制量、肿瘤大小、TNM分期等临床病理因素的关系;在稳定整合HBV基因组的HepG2.2.15细胞系及慢病毒介导的HBx转染HepG2细胞中,进一步验证HBV及HBx过表达对OPN及干性相关转录因子Nanog、Oct4,干性细胞表面标记分子CD44、CD90、Ep CAM表达水平的影响。结果 免疫组化及WB检测结果均表明OPN在HBV阳性的HCC肝癌组织中的表达水平显著高于HBV阴性的肝癌组织（P〈0.05）。HepG2.2.15细胞中OPN的mRNA及蛋白质含量较HepG2细胞显著增加（P〈0.05）;在HepG2细胞中,过表达HBx显著上调OPN mRNA及蛋白质水平（P〈0.05）,流式细胞术定量分析显示过表达HBx的HepG2细胞中Ep CAM、CD90阳性的干性细胞数量明显升高（P〈0.05）,实时定量PCR显示干性相关转录因子Nanog、Oct4及其表面标志分子CD44、CD90、Ep CAM水平显著升高。结论 HBx能够显著上调OPN的表达,并增强肝癌细胞的干性,提示HBx/OPN/肝癌细胞干性增强通路可能在HBV相关HCC患者预后不良中具有重要作用。

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