首页 期刊 林业工程学报 马尾松胚乳DNA高效提取及SSR-PCR体系优化 【正文】

马尾松胚乳DNA高效提取及SSR-PCR体系优化

作者:何卫龙; 杨立恒; 王晓锋; 林能庆; 季孔庶 南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室; 南京210037; 福建省上杭白砂国有林场
马尾松   胚乳dna  

摘要:以马尾松胚乳为试验材料,用CTAB-SDS法提取单粒胚乳DNA,对其浓度和纯度进行检测。结果表明:运用CTAB-SDS法提取的马尾松胚乳DNA浓度高、纯度好,琼脂糖凝胶电泳条带清晰,点样孔干净。此外,还对影响PCR结果的Mg2+、dNTP、模板DNA、引物浓度、TaqDNA聚合酶5个因素进行了正交设计试验,建立了适合马尾松SSR-PCR的反应体系:即在10μL反应体系中,Mg2+浓度为2.80 mmol/L,dNTP浓度为0.35 mmol/L,引物浓度为0.075μmol/L,模板DNA浓度为20 ng/10μL,TaqDNA聚合酶浓度为0.50 U/10μL。

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