作者:郭大龙; 罗正荣 期刊:《农业生物技术学报》 2004年第04期
通过搜寻核酸数据库中柿属植物核苷酸序列,利用Sputnik程序查找微卫星,利用Primer Premier5.0软件设计特异微卫星引物,并对影响PCR扩增的Mg^2+.dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物浓度,以及退火温度等因素进行优化。最终确定柿(Diospyros kaki)和君迁子(D.lotus)SSR-PCR最佳反应体系为:模板DNA30ng,Buffer 1×,Mg^2+2.5mmol/L,dNTPs 0.2mmol/L,TaqDNA酶1U,引物0.3μmol/L,反应总体积20μL,退火温度50℃。
作者:陈祥; 张勇; 李国红; 廖正录; 简承松; 魏泓 期刊:《贵州农业科学》 2004年第04期
以贵州山羊为材料,研究了MgCl2浓度、引物浓度、dNTP浓度、模板DNA用量、TaqDNA聚合酶用量对RAPD反应的影响,建立了一套适合山羊的最佳RAPD反应体系.反应总体积为25μl ,MgCl2浓度2.0mmol/L,引物为18.75ng,dNTP浓度0.32mmol/L,模板DNA为15ng,TaqDNA聚合酶为2U.PCR反应程序为:94℃ 3min;94℃ 1min,38℃ 1min,72℃ 2min,40 Cycles;72℃ 10min.
作者:沈鹤柏; 户敏; 杨仲南; 王晨; 朱龙章 期刊:《科学通报》 2005年第12期
系统研究了基于金纳米粒子的聚合酶链反应(PCR). 通过Au-S键将5′端修饰-SH-(CH2)6-的引物连接在金纳米粒子表面, 采用质粒pBluescript SK作为模板, 分别研究了引物浓度、退火温度和循环次数对PCR的影响. 实验研究结果表明: 在优化的条件下, 将上游引物或下游引物连接在金纳米粒子表面以及将上游引物和下游引物分别连接在金纳米粒子表面, 均能顺利进行PCR. 基于金纳米粒子的PCR技术的建立, 将均相体系中的PCR技术扩展到纳米粒子表...
作者:魏昭; 梁勃; 吴蕊; 孙琛; 王权 期刊:《食品安全导刊》 2016年第5Z期
作者:赵志壮; 白蕙箐; 王宏展; 金海甲; 栾静; 白秀娟 期刊:《黑龙江畜牧兽医》 2014年第10期
药用土鳖虫为鳖蠊科昆虫地鳖(Eupolyphaga sinensis Walker)或冀地鳖(Steleophaga plancyi(Boleny))的雌虫干燥体[1],临床上广泛应用于高脂血症、血栓性疾病和心脑血管缺血等疾病的治疗。目前,缺乏对不同种质的土鳖虫进行系统评价的方法,因此在分子水平上开展对土鳖虫的种质资源研究对于土鳖虫种质资源的合理开发和利用具有重大意义。
作者:陈国梁; 白兴俊; 赵蓉; 雷鸿亮; 陈宗礼 期刊:《生物技术通报》 2010年第08期
以聚合酶链式反应为基础的片段拼接技术——融合PCR技术是一种新的基因片段融合技术。以含有马铃薯块茎两种淀粉合成关键酶ssⅡ和ssⅢ基因为模板,利用融合PCR对其进行融合拼接,初步建立以PCR产物(不回收)及一步PCR法融合基因的构建方法,并对融合基因构建时PCR产物(不回收)的使用量及一步PCR法构建融合基因的中间引物浓度等条件进行优化。结果表明,以不回收的PCR产物为模板构建融合基因时PCR产物(不回收)的使用量在10-20 ng范...
运用L16(4^5)正交设计对芒果ISSR反应的5个因素,即DNA模板浓度、M矿浓度、dNTPs浓度、引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度在4个水平上进行优化试验,通过不同反应体系扩增效果比较,建立优化的芒果ISSR反应体系,