作者:张立国; 秦岩; 李建政; 班巧英; 刘琦 期刊:《中国环境科学》 2020年第02期
为揭示升流式厌氧污泥床(UASB)反应器启动运行效能与互营丙酸降解菌群数量之间的关系,以稀释的玉米淀粉生产废水为底物,考察了UASB启动期的运行特征,并采用实时荧光定量PCR技术(qPCR)分析了互营丙酸降解菌群(丙酸氧化菌和产甲烷菌)的演替规律.结果表明,在进水COD 2000mg/L和水力停留时间(HRT)24h条件下,经过38d的连续运行,COD去除率达到了91.9%.当HRT分阶段缩短至8h时,比产甲烷速率达到了315LCH4/(kg COD·d),且形成了沉降性能良好...
作者:王亨莉; 钟志娟 期刊:《吉林医学》 2020年第03期
作者:廖威; 方丽娟; 邓旭怡; 罗小琴; 雷春洪; 王刚 期刊:《实验与检验医学》 2020年第01期
目的制定HCV-RNA定量检测系统的性能验证方案,评估该检测方法的临床运用价值。方法依据中国合格评定国家认可委员会(CNAS)和卫生行业标准颁布的系列文件,采用卫生部临床检验中心室间质控品、康彻斯坦生产的标准物质、实验室收集的高浓度HCV-RNA临床标本和健康人群阴性血清,对检测系统的精密度、标本携带污染、正确度、分析测量范围、定量限、检出限、分析特异性和抗干扰能力进行验证和评价。结果低浓度和高浓度标本批内精密度分别...
作者:王磊; 任东明 期刊:《生物学通报》 2006年第09期
1荧光定量PCR是什么 荧光定量PCR(fluorescent quantitative PCR,FQPCR)是在PCR定性技术基础上发展起来的定量PCR技术。VQ-PCR技术是一种在PCR反应体系中加入荧光基团.利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法,实现了PCR从定性到定量的飞跃。VQ-PCR仪在普通PCR仪的基础上加上了荧光探头和计算机。
作者:孔丹莉; 周浩; 王茜; 艾云灿; 何玉清; 刘伟伟; 杨杰; 丁元林 期刊:《广东医科大学学报》 2013年第05期
目的 探索快速可靠检测血液标本中光滑念珠菌的新方法.方法 采用真菌26S rDNA D1/D2区序列作为引物,单独和同时扩增光滑念珠菌及白色念珠菌与光滑念珠菌混合物,对血液标本进行荧光定量检测.结果 本方法不仅能够稳定的扩增出光滑念珠菌26S rDNA序列,并且能准确区分出混合物中的白色念珠菌与光滑念珠菌.结论 应用26SrDNA D1/D2区序列的荧光定量PCR是快速、敏感和特异的检测光滑念珠菌方法.
作者:张韶斌; 陈斯亮; 罗莞超; 高映萍; 罗秋红 期刊:《广东医科大学学报》 2008年第04期
目的了解乙肝血清学标志物HBeAg与HBV-DNA水平的临床关系。方法对200例用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果为HBeAg阳性的乙肝患者的血清用荧光定量PCR(FQ-PCR)法进行检测,并对结果进行分析。结果200例HBeAg阳性的血清样本中有195例HBV-DNA检测阳性,阳性率为97.5%。200例中有115例(占57.5%)HBV-DNA为(1-9)×10^7copies/mL,70例(35.0%)为(1-9)×10^4copies/mL,10例(5.0%)为500-1 000 copies/mL,5例(2.5%)未检测到。结...
作者:刘杰; 聂鸿涛; 姜坤银; 王政兴; 孙晓彤; 霍忠明; 闫喜武 期刊:《海洋科学》 2020年第01期
作者:由欣月; 郝雲峰; 崔尚金; 秦彤 期刊:《中国动物传染病学报》 2019年第06期
为建立良好的犬腺病毒检测方法,参考GenBank中犬腺病毒毒株(GenBank登录号:U77082.1)的E3基因,设计并合成了一对特异性引物。扩增的目的片段与pMD19-T载体相连接构建重组质粒,以该重组质粒为模板建立特异性好、灵敏度高且可快速检测犬腺病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。经特异性方法验证,在常见的五种犬病毒病中,本方法只能检测出犬腺病毒存在。敏感性试验结果表明,本方法的灵敏性较普通PCR方法高出100倍。重复性试验结果...
作者:姚梅宏; 杨映红; 黄建平; 冯昌银; 连渊娥 期刊:《临床与实验病理学》 2019年第12期
作者:陶璇; 顾以韧; 杨雪梅; 梁艳; 何志平; 钟志君; 杨跃奎; 曾凯; 陈晓晖; 王言; 龚建军; 应三成; 吕学斌 期刊:《养猪》 2020年第01期
作者:池玉杰; 吴书景; 于存 期刊:《吉林农业大学学报》 2019年第05期
检测了不同浓度的Mn^2+对偏肿革衲菌3个猛过氧化物酶(MnPs)基因Lg-mnpl、2、3在转录水平上的调控作用,为研究MnPs基因的表达调控机制奠定基础。用相关生物信息学方法对基因和蛋白序列进行比对与分析,用qPCR检测了在LNAS培养基内Mn^2+4种不同浓度下(0,40,200,400 μmol/L)3个基因在转录水平上的相对表达量。结果表明:3个Lg-mnps在基因结构上不尽相同,既有较多的相似之处,也存在着差异。在外显子的长度和序列组成、内含子的位置上,Lg-...
作者:任亚初; 朱彤; 楚会萌; 程凯慧; 解晓莉; 张亮; 孙阳阳; 杨宏军 期刊:《山东农业科学》 2019年第12期
本研究旨在建立一种灵敏度高、特异性强、重复性好,能快速检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的方法。根据BVDV的E2基因保守序列,设计合成一对特异性引物,建立了检测BVDV的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。将标准阳性样品10倍梯度稀释检测灵敏度,用能感染奶牛的其它病毒做对照检测特异性,用临床样本检测重复性。结果表明,该方法与能感染奶牛的其它几种病毒均无交叉反应,检出敏感度达4.87×10^1 copies/μL,比常规PCR检测方法高10倍。同时...
作者:崔晓莹; 李泽宇; 李完波; 王志勇 期刊:《集美大学学报·自然科学版》 2019年第05期
变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicid)是引起大黄鱼(Larimichthys crocea)内脏白点病的主要病原。基于变形假单胞菌的 gyrB 基因与大黄鱼的单拷贝基因 gdf-8 分别设计1对特异性引物,对所设计的变形假单胞菌 gyrB 基因的引物特异性进行了检验,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测了400尾人工浸泡感染变形假单胞菌5 d后的大黄鱼幼鱼脾脏中的病原菌的相对含量。结果显示,基于 gyrB 基因所设计的引物对变形假单胞菌检测具有良...
作者:闻子钰; 顾一心; 梁昊; 王佳奇; 鞠长燕; 马艳萍; 张茂俊; 段永翔 期刊:《中国人兽共患病学报》 2019年第09期
目的建立一种快速定量检测食品中“活的”空肠弯曲菌的技术方案。方法通过对103 CFU/m~10^6CFU/mL的空肠弯曲菌进行叠氮溴化乙锭(EMA)的前处理研究,建立区分死菌与活菌的EMA前处理技术,与荧光定量PCR检测弯曲菌的方法相结合,建立EMA-qPCR组合检测技术,并进行模拟食品标本的验证。结果空肠弯曲菌在103 CFU/mL~10^6CFU/mL内,EMA的最优使用浓度为5μg/mL,5μg/mL的EMA-qPCR可区分出死/活空肠弯曲菌混合物中的死菌和活菌,并成功应用于模...
作者:范心凤; 金四华; 高斌; 周豫; 徐媛; 陈先臻; 杨丹; 刘平; 耿照玉 期刊:《安徽农业大学学报》 2019年第05期
为研究生肌因子MyoD基因在皖南三黄鸡不同发育阶段肌肉组织中的表达水平及其与肌肉重量的相关分析。分别于胚胎发育的11胚龄、1日龄、70日龄、98日龄采集胸肌和腿肌组织,并测定1日龄、70日龄、98日龄和126日龄的胸肌重、腿肌重和体重,采用实时荧光定量PCR方法分析MyoD基因在不同阶段胸肌和腿肌中的相对表达量。结果表明,胸肌中MyoD基因随着日龄的增加其相对表达量呈降低的趋势;腿肌中MyoD基因随着日龄的增长其表达量呈先增加后降低...
作者:董珊珊; 李艳苹; 段存娟; 郭英; 石丽媛; 钟佑宏; 栗冬梅; 王鹏 期刊:《疾病监测》 2019年第11期
目的调查2017年云南省剑川县鼠形动物中巴尔通体的自然感染情况。方法2017年3-7月在剑川县用笼捕法捕获鼠形动物,无菌采集其股动脉血并提取DNA,应用荧光定量PCR技术进行巴尔通体检测,对检测阳性的血液样本进行巴尔通体分离培养。结果从剑川县沙溪镇石龙村及金华镇西门社区共捕获鼠形动物372只;经荧光定量PCR检测,阳性208份,阳性率为55.91%;11种鼠形动物中有10种检出阳性,其中大绒鼠的阳性率为38.73%,齐氏姬鼠为72.49%,贝氏树鼩为7....
作者:肖芳; 嵇辛勤; 李基棕; 廖政; 毛立; 李文良; 孙敏; 刘茂军 期刊:《中国预防兽医学报》 2019年第11期
为探究山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染MDBK细胞和气管上皮细胞(BECs)后的抗病毒免疫应答,本研究针对7种干扰素刺激基因(ISGs):IFI6、ISG15、OAS1Y、OAS1Z、Mx1、Mx2及RSAD2的基因序列设计特异性引物,经优化建立了检测7种ISGs的SYBR Green I荧光定量PCR方法。利用所建立的方法检测CPIV3JS2013株感染MDBK细胞和BECs 24 h、48 h和72 h后7种ISGs的m RNA转录水平。结果显示,在MDBK细胞中,CPIV3感染时间越长,7种ISGs的转录水平上调倍数越...
作者:楚会萌; 任亚初; 程凯慧; 解晓莉; 张亮; 孙阳阳; 杨宏军 期刊:《中国兽医科学》 2019年第10期
为建立牛流行热病毒(BEFV)的荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中已登录的BEFV的G基因保守序列设计了1对特异性引物。结果显示,建立的标准曲线线性关系较好,其相关系数为0.996 3。该方法仅对BEFV检测为阳性,表明其特异性强。该方法的检测下限约为4.0×10^1 copies/μL,比普通PCR敏感性高10倍。重复性试验结果显示,该方法的组内和组间变异系数均小于0.76%。利用本方法分别对45份牛病料样品进行检测,结果检出了11份阳性样品,表明...
作者:张彩虹; 杨俊兴; 林彦星; 刘建利; 曹琛福; 史卫军; 花群义 期刊:《中国兽医科学》 2019年第10期
根据非洲猪瘟病毒(ASFV)保守的VP72基因序列,设计特异性引物和探针,经过优化反应体系中各组分及反应条件,建立了直接检测样品中ASFV的荧光定量PCR方法,并分析该方法的特异性和敏感性。结果显示,该直扩荧光定量PCR方法只对ASFV有特异性扩增,对其他几种相似疾病病原的灭活抗原,如猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪圆环病毒、口蹄疫病毒、印第安纳型水泡性口炎病毒、新泽西型水泡性口炎病毒、猪流行性腹泻病毒等检测均呈阴性...
作者:辛晓云; 王斌; 赵岫云; 张德双; 汪维红; 余阳俊; 苏同兵; 于拴仓; 张凤兰 期刊:《中国蔬菜》 2019年第11期
BrVIN3.1在春化过程中通过调控BrFLC1的表观修饰状态,进而调控其表达控制大白菜花期。本试验以BrVIN3.1(Bra020445)为诱饵,进行酵母cDNA文库筛选,从中筛选到它的互作蛋白BrZAT12(Bra006691);进一步进行酵母双杂一对一验证,证明BrZAT12能够与BrVIN3.1互作。采用低温处理不同花期的大白菜材料,进行表达模式分析,发现BrZAT12的表达模式在抽薹性状不同的大白菜材料中存在差异,在易抽薹材料中的表达量明显高于耐抽薹材料,且在耐抽薹材料...