作者:谷颖; 金鑫; 李霞; 沈彩云; 石朋 期刊:《济宁医学院学报》 2019年第06期
作者:陈雪斌; 汪凤兰; 张冠茂 期刊:《西北药学》 2020年第01期
目的探讨鸢尾苷元对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用下心肌成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用差速贴壁法获得纯化的大鼠心肌成纤维细胞,采用MTT法和原位末端标记法检测鸢尾苷元或磷脂肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对AngⅡ作用下心肌成纤维细胞增殖和凋亡的影响,采用RT-PCR检测鸢尾苷元对AngⅡ作用下心肌成纤维细胞中凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA表达的影响,Western blot法检测鸢尾苷元对AngⅡ作用下心肌成纤维细...
作者:崔晓丽; 沈泽; 宋春垚; 蒋济南; 周佳旭; 刘志荣; 王艳春 期刊:《药学学报》 2019年第11期
作者:邹刚玲; 柳玉梅; 张海宁 期刊:《广东药科大学学报》 2015年第03期
目的观察自噬对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblats,CFs)增殖及迁移的影响,并探讨其作用机制。方法消化法培养新生大鼠CFs,AngⅡ诱导新生大鼠CFs增殖,MTT比色法、细胞划痕实验分别检测细胞增殖及迁移情况;Western blot法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)、beclin-1及DGKζ蛋白的表达;DGKζshRNA慢病毒感染CFs下调DGKζ蛋白水平,观察其对CFs自噬的影响。结果 AngⅡ10-7mol·L-1明显促...
作者:任芳; 李家富; 何涛 期刊:《西南医科大学学报》 2008年第03期
目的:研究肾上腺髓质素(ADM)对幼年大鼠心肌成纤维细胞(FBC)增殖的影响,并探讨其可能的作用受体。方法:用差速贴壁分离法获得心肌成纤维细胞为材料,用免疫组化的方法鉴定细胞,并绘制生长曲线。用MTT比色法测定细胞增殖。结果:①ADM对基础状态下的FBC增殖无明显抑制作用,但能呈浓度依赖性地抑制AngⅡ刺激的FBC增殖。②CGRP8—37和ADM22—52均能部分拮抗ADM对AngⅡ的抑制作用,而二者合用几乎能完全拮抗。CGRP8—37对ADM...
作者:钟毅; 李家富 期刊:《西南医科大学学报》 2010年第05期
目的:观察血管紧张素-(1-7)对TGF-β1诱导幼年大鼠心肌成纤维细胞增殖(CF)和胶原合成的影响,并探讨其是否通过cAMP/PKA通路进行介导抗纤维化作用。方法:①细胞分离培养与鉴定:用酶消化法分离细胞,差速贴壁法纯化获得心室肌成纤维细胞为材料,用光学显微镜和免疫细胞化学的方法鉴定细胞。②检测方法:WST-1比色法测定细胞增殖情况,放射免疫法测定Ⅲ型胶原前胶原末端肽(PCⅢ)的含量。结果:①与空白组比较,Ang-(1-7)组呈浓...
作者:高辉; 成威; 彭娜 期刊:《心肺血管病》 2014年第05期
目的:本实验研究了心肌梗死后梗死交界部位微核糖核酸-370(miR-370)的表达情况以及其在梗死后纤维化过程中的作用。方法:建立SD大鼠心肌梗死模型,2w后RT-PCR法、Western blotting法检测心肌梗死交界区TGFβ1、TGFβRⅡ、ColⅠα1、ColⅢα1 mRNA和miR-370的表达情况以及TGFβ1、TGFβRⅡ、α-SMA蛋白的表达。分离、培养SD大鼠乳鼠心肌成纤维细胞,AngⅡ、miR-370干预细胞后检测上述指标的变化。荧光素酶报告实验验证TGFβRⅡ是否为miR-3...
作者:冯健; 李家富; 范忠才; 王帅奇 期刊:《时珍国医国药》 2013年第01期
目的探讨齐墩果酸(OA)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌成纤维细胞(CFs)分泌转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法采用胰酶消化法及差速贴壁法培养大鼠CFs,建立AngⅡ诱导的大鼠心肌间质纤维化体外模型,采用MTT法检测各组CFs增殖活性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组CFs上清液中TGF-β1水平。结果与对照组比较,AngⅡ组CFs增殖活性及分泌TGF-β1水平明显增加(P〈0.05);60,100μmol/L OA组CFs增殖活性及分泌TGF-β1水平较AngⅡ组...
作者:罗丽芳; 李青; 蔡立婧 期刊:《中国医药导报》 2019年第11期
作者:苗雨润; 宋庆凯; 匡德宣; 陈玲霞; 尹博文; 李晓飞; 代解杰 期刊:《中国心血管病研究》 2017年第10期
目的研究应用树鼩建立人类心血管病理、毒理细胞模型的纯度较高、活力较强的心肌细胞和心肌成纤维细胞的方法。方法使用差速贴壁1.5h纯化心肌细胞进行培养,并比较5-溴-2-脱氧尿苷、阿糖胞苷及TGF—β抑制剂的纯化效率以获取最适纯化方案,培养过程在37℃、5%CO2条件下进行。使用MTT法测定细胞活力以确定方法可行性。利用α-横纹肌肌钙蛋白(α-SA)及心肌肌钙蛋白I(TnI)对树鼩心肌细胞进行免疫组化及免疫荧光鉴定,利用波性蛋白...
作者:张海涛; 赵连友; 刘朝中; 罗惠兰; 于心亚; 孙津津 期刊:《中国组织工程研究》 2005年第19期
目的:观察基础和卡维地洛干预条件下,高血压大鼠和Wistar大鼠心脏成纤维细胞增殖细胞核抗原蛋白表达及脱氧核糖核酸合成变化对心肌纤维化的影响.方法:实验于2001-10/2002-12在解放军空军总医院临床试验中心及解放军第四军医大学唐都医院高血压实验室完成.实验选用12周龄血压176~190mmHg(1 mm Hg=0.133kPa)的高血压大鼠10只,培养心脏成纤维细胞,按随机数字法将其分为空白对照组和0.01,0.10,1.00,10.00μmol/L卡维地洛干预72 h组;选...
作者:张俊悦; 殷国田; 郭志坤 期刊:《解剖学报》 2018年第04期
目的探讨心肌成纤维细胞(CFs)向内皮细胞分化以及成血管潜能。方法新鲜左心室组织,体外分离、培养、纯化CFs,利用内皮细胞诱导液对第3代CFs诱导培养,连续诱导培养28 d后,换用内皮细胞培养基(ECM),并消化传代扩增至第3代。观察诱导细胞生长情况和形态变化,利用免疫细胞化学法、流式细胞术和血管形成分析实验对诱导后细胞的内皮细胞标志物的表达和功能特性进行评价。结果新生大鼠第3代CFs,呈三角形、梭形和多边形,增殖速度迅速;...
作者:王益民; 张红霞; 靳世久; 王津生; 张伯礼 期刊:《中华物理医学与康复》 2004年第11期
作者:朱珂; 娄利霞; 高永红; 国倩倩; 吴丹丹; 高毅洁; 王曼曼; 张冬梅 期刊:《医学综述》 2019年第13期
作者:范延红; 赵连友; 王海昌 期刊:《西北国防医学》 2004年第02期
目的:探讨精氨酸升压素(AVP)对心肌成纤维细胞(CFs)胶原合成和-氧化氮(NO)合成的影响.方法:胰酶消化法分离培养新生SD大鼠CFs,3H-脯氨酸掺入法测定CFs 胶原合成功能,硝酸还原酶法测定CFs NO含量.结果:①不同浓度AVP干预下CFs的3H-脯氨酸掺入率随AVP浓度增加而增高,其中10-6mol*L-1 AVP组的3H-脯氨酸掺入率显著高于对照组;10-7mol*L-1 AVP干预下CFs的3H-脯氨酸掺入率随培养时间延长而增高,其中36 h组的3H-脯氨酸掺入率显著高于6 h组...
作者:陈勇兵; 陈如坤; 陈力; 吴明; 施立; 杨文涛; 钱永跃 期刊:《江苏医药》 2005年第03期
目的建立乳鼠心肌成纤维细胞培养模型.方法通过对经典的差速贴壁分离法稍作改进,采用每次贴壁60 min、两次差速贴壁分离法收集、培养心肌成纤维细胞.结果形态学观察和免疫细胞化学染色鉴定显示,成功培养心肌成纤维细胞,纯度达95%以上.结论该研究成功建立乳鼠心肌成纤维细胞培养模型,为高纯度心肌成纤维细胞的获得和对其病理生理学的进一步研究打下良好基础.
作者:向家培; 雷玉华 期刊:《中华老年多器官疾病》 2019年第09期
目的探讨栀子苷(GE)对高糖诱导过程中体外培养的乳鼠心脏成纤维细胞(CF)表型转化及胶原合成的影响及机制。方法提取新生大鼠原代CF,给予高糖刺激(葡萄糖浓度为33.3mmol/L)和GE干预,24h后,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定CF细胞内Ⅰ型胶原(ColⅠ)、ColⅢ及结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA表达水平;试剂盒检测氧化应激相关指标,包括超氧化物歧化酶(SOD)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)活性及丙二醛(MDA)的产量;Westernblo...
作者:沈豪; 郭霜; 刘秀芬; 鲍翠玉; 徐魁 期刊:《中国药理学通报》 2018年第04期
作者:孟哲; 李海禹; 陶海龙 期刊:《中国药理学通报》 2018年第06期
目的 观察虾青素(astaxanthin,ASTX)对转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)诱导的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)I型胶原(collegeⅠ,ColⅠ)和Ⅲ型胶原(collegeⅢ,ColⅢ)表达的影响,并探讨其作用机制。方法 分离新生乳鼠的CFs,TGF-β1诱导CFs,使用ASTX(0、5、10、20、40、80、160μmol·L~(-1))预处理CFs 24h。采用MTT法测定不同浓度ASTX对CFs细胞活性的影响;采用DCFH-DA试剂盒检测CFs细胞内...
作者:刘丹; 田孝祥; 刘美丽; 刘艳霞; 齐艳萍; 陶杰; 闫承慧 期刊:《解放军医学》 2019年第01期