作者:周辉芳; 隗和儒; 马士朝; 张超群; 王君平; 杨新英; 谢英; 孙殿兴 期刊:《临床肝胆病》 2020年第02期
作者:李晓梅; 曾养志 期刊:《生物学通报》 2004年第01期
哺乳动物细胞系(株)已在细胞遗传学、分子遗传学和生物医学等方面得到越来越广泛的应用。其已被用于基因定位、检测理化因素的毒性和细胞因子活性、生产单克隆抗体、制备组织工程化人工器官和转基因动物等方面,更是研究发育生物学、肿瘤发生学、肿瘤治疗等不可或缺的材料。综述了哺乳动物细胞系(株)的建立方法及其在以上各方面的应用。
作者:薛耀华; 麦志达; 覃晓琳; 曾维英; 吴兴中; 黄进梅; 郑和平 期刊:《皮肤性病诊疗学》 2017年第01期
目的:比较McCoy、Hela、Vero、HaCat四种细胞培养沙眼衣原体的易感性及药物敏感性试验结果。方法:将5 000和1 000 IFU的衣原体分别接种到McCoy、HeLa、Vero、HaCat细胞中,培养48和72 h,通过碘染色和单克隆荧光抗体染色法,观察衣原体包涵体的数量。比较四种细胞对衣原体的易感性和两种染色方法的敏感性。培养McCoy和HeLa细胞,进行10株衣原体临床株对5种抗生素的药物敏感性试验,观察衣原体的最小抑菌浓度(MIC)。结果:在衣原体感...
作者:雷钧; 顾鸣敏 期刊:《世界科学》 2005年第06期
作者:张崇本; 张晓兰; 李成健; 成俊英; 吴显荣 期刊:《中国生物化学与分子生物学报》 2004年第05期
用增强绿色荧光蛋白特异性标记小鼠3T3-L1前脂肪细胞系.构建paP2-promoter-EGFP载体,电穿孔转染小鼠3T3-L1前脂肪细胞,显微荧光观察和RT-PCR确认aP2基因的内源表达.EGFP基因转入3T3-L1前脂肪细胞,观察到细胞分化过程中EGFP表达和脂肪积累.RT-PCR分析表明,EGFP代表了稳定而真实的aP2基因的内源性表达.建立了由脂肪组织特异表达基因。P2的表达控制的EGFP标记的小鼠3T3-L1前脂肪细胞系,目前尚未见用同样方法对前脂肪细胞进行...
作者: 期刊: 2019年第08期
近日,来自哈佛干细胞研究所C. F. Kim教授的研究团队发现现有的肺癌治疗方法或可导致肿瘤本身进展,其最新的研究成果发表于《Nature Communications》杂志。'全球肺癌关注月'是世界肺癌联盟在2001年11月发起的一项全球性倡议,把每年的11月定为'全球肺癌关注月',旨在呼吁世界各国重视肺癌的预防,这一呼吁得到世界上许多国家的响应。先前的研究发现通过更改影响基因表达的表观遗传学调节分子可以达到有效的抗癌效果,这成为目前肿瘤研...
作者:卢康荣; 孔天翰; 董伟华 期刊:《广州医科大学学报》 2006年第04期
目的:探讨中华眼镜蛇毒卡迪(KD)中进一步分离纯化的10个组分KDⅠ-1、KDⅠ-1H、KDⅠ-2、KDQⅠ-2、KDⅡ、KDⅡ-2、KDⅡ-3,KDⅢ-1,KDⅢ-2和KDⅢ-2对神经胶质瘤细胞U251的抑制作用。方法:采用MTT法和台盼蓝拒染法观察各组分对U251细胞增殖的影响。结果:在1~100μg/ml.的浓度范围内用MTT法筛选出3个具有显著抑制作用的组分KD、KDⅡ-3和KDⅢ-1,对以上3种组分再次细分浓度后(5、10、30、50、80、100μg/mL)的MTT结果显示以上三...
作者:李晓栋; 李君武; 宋东; 周曙光; 王珊; 黄清华 期刊:《广州医科大学学报》 2007年第06期
目的:构建可表达丙型肝炎病毒(HCV)EGFP-CORE融合蛋白的真核表达载体,获得重组质粒稳定转染的QSG7701细胞系。方法:克隆HCV核心抗原基因于真核表达载体pEGFP-C1中,脂质体法转染QSG7701细胞后,荧光显微镜及免疫细胞化学染色检测EGFP-CORE融合蛋白的表达。再经持续G418压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系。最后用Western blotting鉴定融合蛋白的表达。结果:成功构建真核表达载体pEGFP-C1/CORE;建立了重组质粒稳定转...
作者: 期刊:《中华人民共和国农业部公报》 2013年第01期
第1869号《拖拉机号牌座设置技术要求》等141项标准业经专家审定通过,现批准为中华人民共和国农业行业标准,自2013年3月1日起实施。特此公告。2012年12月7日
作者:林海华; 余玉红; 张绍敏; 陈出新; 刘国军; 张丽 期刊:《精准医学》 2019年第02期
作者:王鹏; 宋扬; 高丽鹤; 付敏; 陈沉 期刊:《精准医学》 2016年第03期
目的观察肌醇六磷酸(IP6)、肌醇(Ins)及两者合用对多种癌细胞增殖的抑制效果。方法取培养至对数生长期的人肝癌细胞Hep G2、人结肠癌细胞HT-29、人胃癌细胞7901、人乳癌细胞MCF-7和人肺癌细胞A549,接种于96孔板中,分别加入0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L的IP6、Ins及IP6+Ins(1∶1,V/V)混合液,另设对照组(不加药物)。应用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测定不同浓度的IP6、Ins和两种药物合用作用于不同癌细胞48 h的抑制率,计算IP6...
作者:乔俊梅; 薛冬梅 期刊:《精准医学》 2008年第04期
细胞外基质是指分布于细胞外空间,由细胞分泌蛋白和多糖所构成的网络结构。长期以来,人们普遍认为,细胞外基质只是作为结缔组织细胞的框架而起作用。然而,随着研究的进展,人们发现,细胞外基质不仅仅是一种支持物,而且在调节细胞的活动中起到很重要的作用。例如.细胞外基质蛋白可为与之接触的细胞提供特别丰富的信号,从而调节细胞的各种执行功能。细胞外基质中的某些大分子可被部分水解,产生不同的肽.可调节细胞的活动,...
作者:韩泓泽; 魏宾; 隋栋; 李帅 期刊:《精准医学》 2018年第06期
目的 提出一种基于U-Net的乳腺癌淋巴结病理切片中的细胞检测方法,用以辅助医生进行乳腺癌细胞筛查.方法 基于U-Net网络,利用医生预先标注的数据集训练模型,用以实现最终的细胞检测.结果 针对癌细胞检测的结果准确率大于99%.结论 基于U-Net的乳腺癌病理切片中癌细胞检测方法可以极大程度提升医生在病理切片中癌细胞筛查的效率,同时还可以对疑似癌细胞目标进行判断.
作者:段文晶; 李少游; 尧乾; 蒋爱梅; 马芸 期刊:《中华普外科手术学》 2018年第06期
目的 研究siRNA特异性靶向沉默Livin基因对人乳腺癌MCF-7多药耐药细胞耐药性的影响。方法 采用ADM低浓度梯度递增结合大剂量间歇诱导方法建立5-FU诱导的多药耐药细胞系,采用ATP生物荧光肿瘤体外药物检测技术(ATP-TCA)法检测细胞耐药性,采用免疫组织化学方法检测Livin蛋白在MCF-7耐药细胞株系中的表达情况,采用Livin SiRNA联合表柔吡星、5-氟尿嘧啶、多西他赛、健择诱导乳腺癌MDR细胞的凋亡。采用SPSS 20. 0处理数据,耐药情况、细...
作者:齐珺; 张梅; 贺鹏程; 王鸿丽; 王新阳 期刊:《中华血液学》 2010年第11期
目的 获得并鉴定雄黄(四硫化四砷,As4S4)诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)维甲酸耐药细胞株NB4-R1细胞凋亡的差异蛋白质组.方法 运用高分辨二维双向电泳获得As4S4诱导NB4-R1细胞凋亡前后的蛋白质组表达谱,通过凝胶图像分析筛选出差异蛋白,经胶内酶解后应用MALDI-TOF-MS、MALDI-TOF/TOF、UPLC-MS/MS串联质谱技术和生物信息学鉴定差异蛋白.结果 共筛选鉴定出22个表达升高2倍以上或降低50%以上的蛋白质点,最终获得21种已知蛋白,包括...
作者:杨国姿; 李薇; 马克威; 杜忠华; 李玲 期刊:《中华血液学》 2009年第06期
目的通过检测NB4细胞活化JAK1蛋白水平探讨三氧化二砷(As2O3)对其增殖抑制的分子生物学机制。方法利用Westernblot检测NB4细胞JAKl蛋白表达及磷酸化水平;用小分子RNA(siRNA)干扰NB4细胞JAKl蛋白的表达及转染JAK1质粒使NB4细胞内JAK1过表达;应用MTT法及锥虫蓝拒染法观察在JAK1基因沉默或过表达的状态下,As2O3抑制NB4细胞增殖的变化情况;在此基础上利用Westernblot方法进一步检测磷酸化JAK1蛋白(p-JAK1)及细胞周期抑制蛋白...
作者:徐喜慧; 欧阳建; 陈军浩; 谢品浩; 夏永泉 期刊:《中华血液学》 2008年第06期
目的探讨丝(苏)氨酸蛋白磷酸化酶2A(PP2A)抑制剂冈田酸(Okadaic acid,OKA)对全反式维甲酸(ATRA)诱导白血病细胞分化的影响,探讨PP2A活性与白血病细胞ATRA耐药的关系。方法用ATRA、OKA、ATRA+OKA分别作用于急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞及其耐药细胞系MR2细胞,采用瑞特染色法和NBT还原实验观察细胞形态变化,流式细胞术分析细胞表面CD11b表达,丝(苏)氨酸蛋白磷酸化酶试剂盒检测细胞内PP2A活性,Westernblot法检...
作者:余妙容; 李劲高; 杜欣; 林伟; 牛新青; 郭坤元 期刊:《中华血液学》 2007年第06期
目的 研究法尼酰基转移酶抑制剂手霉素(Manumycin)诱导白血病细胞凋亡的机制。方法 用2μmol/L手霉素处理白血病细胞系U937和HL-60细胞不同时间,用流式细胞术检测细胞凋亡。免疫印迹技术检测细胞色素C、caspase9、caspase8、caspase3的表达。用荧光染料JC-1检测法测定线粒体膜电位(Δψm),并用caspase抑制剂Z—VAD—fmk阻断caspase的活化,探讨caspase在手霉素诱导白血病细胞凋亡中的作用。结果 2μmol/L手霉素处理U937和HL-60...
作者:郁心; 张海峰; 王金志; 谢宇锋; 杨吉成; 缪竞诚 期刊:《中华血液学》 2007年第06期
目的 研究生长抑制因子4(ING4)基因表达对K562细胞增殖的影响。方法 将经过定点突变技术人源化改造的ING4(鼠→人)生长抑制因子4基因酶切并连接到pAdTrack-CMV转移质粒上,然后与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack—CMV—hING4,将它转染QBI-293A细胞后收获重组腺病毒Ad—hING4(以下简称为Ad-ING4)。将Ad-ING4感染K562细胞,光学显微镜下观察病毒感染前后细胞形态的变化,免疫细胞...
作者:李蕾; 刘凌波; 王利; 邹萍 期刊:《中华血液学》 2008年第06期
目的研究急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞MLL-AF9融合基因沉默对p27表达及转录调控的影响。方法选择THP-1细胞特有的MLL-AF9融合基因为靶基因,设计并合成MLL-AF9小干扰RNA(siRNA)片段。应用脂质体转染方法,将MLL-AF9 siRNA导入细胞,通过流式细胞术检测siRNA转染效率,用RT-PCR法比较转染前后MLL-AF9 mRNA表达水平的变化,Western blot检测MLL-AF9蛋白水平沉默效果,比较细胞周期抑制蛋白p27表达变化,利用染色质免疫沉淀(...